サトイモプロトプラストからの植物体再生系の確立と再生植物における変異の調査

芋头原生质体植物再生体系的建立及再生植物突变研究

基本信息

批准号：
06760033
负责人：
村上賢治
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760033/
关键词：
サトイモプロトプラスト培養カルス培養

项目摘要

1.‘えぐいも'におけるプロトプラストの材料カルスの作成法‘えぐいも'ではこれまで,プロトプラストを単離するのに適したカルスが得られるまで1年以上を要し,カルス細胞の分裂や再生能力の低下が問題となった.そこで材料に適したカルスを短期間で得る方法を検討した.組織学的観察の結果,柔らかいカルスは黄化茎の表皮のすぐ下層の細胞を起源とすることが分かった。そこで,黄化茎切片を2mg/1の2,4-Dと2ipを添加したMS培地で培養して20日後に,カルス化した表皮部分を切り出し培養すると,均一な柔らかいカルスがすぐに得られた.また,2mg/1のNAAと2ipを添加したMS培地でのカルス誘導を試みた.その結果,増殖が速く再生能力の高いカルスが得られた.しかしこのカルスは,比較的大きな細胞塊により構成されていることから,懸濁細胞になりにくくプロトプラストの収量は低かった.このことから,プロトプラストの単離法の再検討や細胞の遊離化法の検討が必要であると考えられた.2.プロトプラストから再生した植物の変異‘えぐいも'のプロトプラストから再生した植物は,生長が非常に遅く,葉が小さいといった異常形態を示した.‘八頭'のプロトプラストから再生した植物は比較的正常に生長したが,球茎頂芽の茎頂を培養して生長させた植物と比較すると生長が遅かった.また,再生植物は,形態や生長速度の個体差が大きかった.これらのことから,変異が発生している可能性が考えられた.プロトプラストを経由せずに材料カルスから直接再生させた植物にも同様の異常がみられたことから,材料カルスの段階ですでに変異が起こっていると考えられた.染色体数では異常はみられなかったが,今後形態やDNAの調査などによりさらに変異の解析を行う必要がある.

1.“Eguimo”原生质体材料愈伤组织的制作方法迄今为止，在“Eguimo”中，需要一年多的时间才能获得适合分离原生质体的愈伤组织，并且愈伤组织细胞的分裂和再生能力不足，因此我们进行了研究。一种在短时间内获得适合材料的愈伤组织的方法。组织学观察的结果，我们发现软愈伤组织起源于发黄茎的表皮正下方的细胞。因此，如果我们将黄化的茎切片在添加了2mg/1 2,4-D和2ip的MS培养基中培养，20天后切下愈伤组织形成的表皮并进行培养，我们也可以立即获得均匀的软愈伤组织。尝试在补充有 2 mg/1 NAA 和 2ip 的 MS 培养基中诱导愈伤组织。然而，由于该愈伤组织由较大的细胞簇组成，难以形成悬浮细胞，原生质体产量较低。这导致对原生质体分离方法的重新审视和2.原生质体再生的突变'Eguimo'植物的原生质体。原生质体再生的植物表现出异常的形态，例如生长非常缓慢，叶子很小，八头原生质体再生的植物生长相对正常，但培养球茎顶芽的茎尖时，生长速度比植物慢。而且再生植株的形态和生长速度存在较大的个体差异。人们认为，不经过原生质体而直接从材料愈伤组织再生的植物中也可能出现类似的异常，这表明在材料愈伤组织阶段就已经发生了突变，虽然没有观察到染色体数量的异常，但这是可能的。有必要通过检查形态和 DNA 进一步分析突变。