神経機能におけるNotch/RBP-Jシグナルの役割の解析

Notch/RBP-J信号在神经功能中的作用分析

基本信息

批准号：
17689014
负责人：
谷垣健二
金额：
$ 19.39万
依托单位：
Research Institute, Shiga Medical Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17689014/
关键词：
RBP-J 大脳皮質 conditional knockout Notch 神経発生 conditional knockout mice

RBP-J 大脳皮質 conditional knockout Notch 神経発生 conditional knockout mice

项目摘要

我々は神経細胞におけるREP-Jの機能を解析するため、RBP-J-floxed miceを神経細胞特異的にCreを発現するCaMKII-Cre transgenic miceとかけあわせることによって神経細胞特異的にRBP-Jの欠損を誘導した。CaMKII-Cre transgenic miceはtransgenic lineによって大きくCreを発現する時期が異なることが知られている。我々は胎生期の15日におけるNestin陰性・Hu陽性の未成熟神経細胞よりCreの発現が認められるtransgenic lineと生後10日以降の神経細胞にしかCreが発現されないtransgenic lineの2種類を用いて解析を行った。未成熟神経細胞においてRBP-Jの欠損を誘導すると、神経細胞の成熟遅延が認められ、神経細胞の中間帯から皮質板への移行が障害されることがわかった。神経細胞の中間帯から皮質板への移行にはReelinやCDK5のシグナルが関与していることが知られているので、RBP-J欠損がこれらのシグナル伝達に与える影響の生化学的検討を行った。生後10日以降の神経細胞においてRBP-Jの欠損を誘導した揚合、神経細胞の成熟異常は認められなかったことから、この系を用いれば神経機能におけるRBP-Jの役割を明らかにすることができると考えられた。現在、我々は神経特異的RBP-J欠損マウスを用いてlocomotor activity, pre-pulse inhibition, morris water maze等の行動実験によるスクリーニングを行っている。

为了分析REP-J在神经元中的功能，我们通过与CAMKII-CRE转基因小鼠合作诱导神经元特异性RBP-J缺乏症，该小鼠在神经元中特异性表达CRE。众所周知，Camkii-Cre转基因小鼠表达CRE的时间取决于转基因线的不同。我们分析了两种类型：转基因线，其中在胚胎阶段15天的未成熟巢穴阴性和HU阳性神经元中观察到CRE表达，而转基因线，其中仅在10天后在神经元中表达CRE。发现未成熟神经元中诱导RBP-J缺陷延迟了神经元的成熟，从而损害了从神经元中间区向皮质板的过渡。由于众所周知，reelin和CDK5信号参与了从神经元中间区到皮质板的过渡，因此我们对RBP-J缺乏对这些信号的影响进行了生化研究。由于观察到生命10天后的RBP-J诱导的神经元缺陷的成熟中没有异常，因此人们认为使用该系统可以揭示RBP-J在神经功能中的作用。目前，我们正在使用行为实验，例如运动活性，脉冲抑制，莫里斯水迷宫来筛选神经特异性的RBP-J缺陷小鼠。