Notchシグナルによるグリア細胞分化誘導機構の分子生物学的解析

Notch信号诱导胶质细胞分化机制的分子生物学分析

• 批准号: 02J01040
• 负责人: 谷垣 健二
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J01040/
• 关键词: Notch; RBP-J; 大脳皮質; 層構造; Notch; RBP-J; 大脳皮質; 層構造

RBPJをノックアウトするとE9-E10で胎生致死となるため神経発生後期のNotch/RBP-Jシグナルの解析は不可能であった。そのため当研究室で作製されたCre/loxP systemを利用したRBP-J conditional knockout miceを用い神経系におけるRBP-Jの機能解析を行なっている。Creを前脳領域に導入するためin vivo electroporationを用いた。E14においてin vivo electroporationによって遺伝子導入される細胞は生後layer II/IIIの錐体細胞になるが、RBP-Jが欠損するとlayer II/IIIの錐体細胞がlayer IVの非錐体細胞へと変化することがわかった。大脳皮質層構造は種々の細胞の運命決定とそれに相関した細胞の誕生のタイミングに基づいて形成される。我々の知見は、Notch/RBP-Jシグナルが細胞の誕生時期を調節することによって大脳皮質における層特異的な細胞種の運命決定を行なっていることを示唆している。

在E9-E10上敲出RBPJ会导致胚胎致死性，因此在神经发生过程中对Notch/RBP-J信号的分析是不可能的。因此，我们使用我们实验室生成的CRE/LOXP系统对神经系统中RBP-J进行了功能分析。体内电穿孔用于将CRE引入前脑区域。通过E14的体内电穿孔转染的细胞成为II/III层锥体细胞，但是当RBP-J缺乏不足时，II/III/III层锥体细胞被转化为IV层非锥虫细胞。皮质结构是根据各种细胞的命运确定及其相关出生的时间来形成的。我们的发现表明，Notch/RBP-J信号通过调节细胞出生时间来确定大脑皮层的层特异性细胞类型命运。