細胞外に存在する分子シャペロンは間葉系幹細胞の増殖や分化を制御する

细胞外分子伴侣控制间充质干细胞的增殖和分化

• 批准号: 17791328
• 负责人: 帖佐 直幸
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791328/
• 关键词: カルレティキュリン; ミエロペルオキシターゼ; 間葉系幹細胞; スクレイピー反応遺伝子; 細胞外マトリックス; 分化; ミエロペルオキシダーゼ

平成17年度に、分子シャペロンであるカルレティキュリン(CRT)がin vitroでミエロペルオキシダーゼ(MPO)と結合し、MPOの最大反応速度が増加することを明らかにした。しかしながら基質特異性には影響しないことから、本年度はCRTとMPOの相互作用について、特にCRT存在下におけるMPO特異的阻害剤の影響を解析した。その結果、MPO活性における50%阻害濃度はsalicylhydroxamic acidがCRT存在下・非存在下ともに500μMであったのに対し、4-aminbenzoic hydrazideはCRT存在下で80μM、非存在下では2.5μMであった。このことから阻害様式の違いによってCRT存在下での阻害効果に差が生じることが示された。一方、昨年度にヒト間葉系幹細胞(hMSC)の分化を制御する新たな候補因子としてスクレイピー反応遺伝子1(SCRG1)を同定した。本年度も引き続きSCRG1の性状解析と、hMSCの分化における役割について検討した。その結果、SCRG1はデキサメタゾン処理で負に制御されること、細胞外へ分泌されること、ジスルフィド結合を介してホモダイマーを形成することが明らかになった。さらに、プロテインアレイでSCRG1と結合するタンパクを検索した結果、ラジニン(LAD1)が同定された。LAD1はヘミデスモゾームと基底膜の接着部位でコラーゲン、インテグリン、ラミニン等とコンプレックスを形成することが知られている。この事実はSCRG1が細胞の接着や伸展、増殖等に関与している可能性を示唆している。また、siRNAでhMSCのSCRG1をノックダウン結果、骨分化マーカーであるアルカリホスファターゼの発現が上昇した。このことからSCRG1はhMSCの分化を制御している可能性が示唆された。

在2005年，揭示了分子伴侣钙网蛋白（CRT）在体外结合髓过氧化物酶（MPO），从而增加了MPO的最大反应速率。但是，由于它不会影响底物特异性，因此今年我们分析了CRT与MPO之间的相互作用，尤其是在CRT存在下MPO特异性抑制剂的影响。结果，在存在和不存在CRT的情况下，MPO活性的50％抑制浓度为500μM，而在CRT不存在CRT的情况下，在CRT和2.5μm的情况下，4-氨基苯甲酸氢化氮化物为80μM。这表明不同的抑制模式会在CRT存在下导致抑制作用差异。同时，去年，我们确定crapie-respons基因1（SCRG1）是调节人间充质干细胞（HMSCS）分化的新候选因素。今年，我们继续研究SCRG1的表征及其在HMSC差异化中的作用。结果，揭示了SCRG1受到地塞米松治疗的负调节，细胞外分泌，并通过二硫键形成同二聚体。此外，由于在蛋白质阵列中搜索蛋白质与SCRG1的结合而被鉴定出根部（LAD1）。已知LAD1与胶原蛋白，整联蛋白，层粘连蛋白等形成复合物，在Hemidesmosmosmes和基底膜之间的粘附位点形成。这一事实表明，SCRG1可能参与细胞粘附，延伸，增殖等。此外，由于用siRNA击倒HMSC中的SCRG1，碱性磷酸酶的表达（骨分化的标志）的表达增加了。这表明SCRG1可能调节HMSC分化。

项目成果

DNA microarray analyses of gene expression in human mesenchymal stem cells cultured in osteogenic differentiation medium for 14 days.

DNA 微阵列分析在成骨分化培养基中培养 14 天的人间充质干细胞的基因表达。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Oral Tissue Engineering 3・1
• 作者: In-Hwan Jang;Naoyuki Chosa (共に筆頭者);Masayuki Taira
• 通讯作者: Masayuki Taira

ヒトロ腔扁平上皮癌細胞におけるgalectin-1のanoikisへの関与

Galectin-1参与人管腔鳞状细胞癌细胞的失巢凋亡

• 发表时间: 2007
• 期刊: 口腔組織培養学会誌 16
• 作者: Takahashi M;Mizoguchi T;Uehara S;Nakamichi Y;Yang S;Naramoto H;Yamashita T;Kobayashi Y;Furusawa K;Udagawa N;Uematsu T;Takahashi N.;平 雅之;Toshihide Mizoguchi;Taira M.,Chosa N.,Sasaki K.,SaitohS.,Nezu T.,Sato N.,Araki Y;Masahiro Takahashi;鎌田 仁
• 通讯作者: 鎌田 仁