アポトーシス関連遺伝子を用いた椎間板組織の細胞周期・老化変性の制御機構の解明

利用凋亡相关基因阐明椎间盘组织细胞周期和衰老退变的控制机制

基本信息

  • 批准号:
    17790991
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.43万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2005
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2005 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

これまで,椎間板の変性変化には椎間板細胞のアポトーシスが関与している可能性があることが示唆されていたが,その詳細なメカニズムは依然不明であった.本研究ではアポトーシスにおいて直接的な役割を果たす遺伝子群と,椎間板細胞を用いた遺伝子導入実験を行い,椎間板細胞のアポトーシス誘導機構の解析とこれらが椎間板変性に及ぼすメカニズムについての検討を行った.ラットアポトーシス抑制遺伝子:Bcl-2に対する最適化遺伝子合成を行い発現プラスミドを構築した.これをラット椎間板より採取拡大培養した椎間板細胞に遺伝子導入した.遺伝子導入48時間後に血清飢餓を開始しアポトーシスを誘導した.Bcl-2を過剰発現した系では,コントロール群に比べTunne1法にて断片化DNAが減少し,FACSにおいてもアポトーシス陽性細胞の減少が確認された.同時にRT-PCRにてCaspase3の発現量が低下していた.つまり,Bcl-2の過剰発現はCaspase3によるアポトーシスの実行を抑制することが明らかになった.椎間板細胞アポトーシスを遺伝子レベルで抑制することで椎間板変性に対する初期治療に応用できると思われる.
到目前为止,已经提出,椎间盘细胞的凋亡可能与椎间盘的退化性变化有关,但是该机制的详细机制尚不清楚。在这项研究中,我们进行了一组基因,这些基因在使用椎间盘细胞中直接作用在凋亡和基因转移实验中,并研究了影响椎间盘变性的机制。我们优化了大鼠凋亡抑制基因:BCl-2的基因合成,并构建了表达质粒。这是从椎间盘细胞中获得的,这些椎间盘细胞在椎间盘细胞中培养。基因转移。基因转移后48小时开始血清饥饿并诱导凋亡。在过表达Bcl-2的系统中,与对照组相比,TUNNE1方法减少了碎片DNA,并且在FACS中也证实了凋亡阳性细胞。同时,RT-PCR降低了CASPASE3的表达水平。换句话说,据表明,Bcl-2的过表达抑制了caspase3对凋亡的执行。通过抑制基因水平的椎间盘细胞凋亡,很可能可以应用于椎间盘变性的早期治疗。

项目成果

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专利数量(0)
Secondary medulla oblongata involvement following middle cervical spinal cord injury associated with latent traumatic instability in a patient with ossification of the posterior longitudinal ligament.
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Sudo H;et al.
  • 通讯作者:
    et al.
Burkholderia Pickettii Spondylitis
皮氏伯克霍尔德杆菌脊柱炎
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Sudo H;et al.
  • 通讯作者:
    et al.
Long-term follow up of surgical outcomes in patients with cervical disorders undergoing hemodialysis
  • DOI:
    10.3171/spi.2006.5.4.313
  • 发表时间:
    2006-10-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.8
  • 作者:
    Sudo, Hideki;Ito, Manabu;Minami, Akio
  • 通讯作者:
    Minami, Akio
Minimally Invasive Surgical Treatment for Tuberculous Spondylodiscitis
  • DOI:
    10.1055/s-0029-1220685
  • 发表时间:
    2009-10-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ito, M.;Sudo, H.;Minami, A.
  • 通讯作者:
    Minami, A.
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