プレーナーメンブランを用いた細胞傷害性T細胞の自己認識機構の解明

使用平面膜阐明细胞毒性 T 细胞的自我识别机制

基本信息

批准号：
17790330
负责人：
横須賀忠
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

T細胞と抗原提示細胞との情報交換の場として、2つの細胞の接触面に形成される「免疫シナプス」が知られている。免疫シナプスは、T細胞受容体(TCR)が集まる中心部位c-SMAC(central-supra molecular activation cluster)と、接着分子が集まる周辺部位p-SMAC(peripheral-SMAC)から構築される。昨年度までにわれわれは、プレイナーメンブレン法と全反射蛍光顕微鏡との複合実験系を構築し、T細胞が抗原提示細胞およびプレイナーメンブレンと接触する際、TCRが50-100からなる集合体(TCRマイクロクラスター)を形成し、以後、それらが接触面の中央に移動しc-SMACを形成することを観察した。また各々のクラスターには活性化シグナル伝達分子が会合しており、個々のTCRマイクロクラスター自身がシグナルソームとして働き、T細胞活性化の発動と維持を担っていることを明らかにした(Nat.Immunol.:6,1253,2005)。一方、T細胞の完全な活性化やその維持には、TCRからの刺激だけでなく、CD28を始めとする副刺激分子からのシグナルが必要であると提唱されてている。今年度、われわれは、CD28のリガンドであるCD80分子をプレイナーメンブレン法に導入し、T細胞の抗原認識の際の、CD28分子の挙動を解析した。その結果、活性化が惹起される初期には、CD28がTCRマイクロクラスターに共局在する一方、活性化の維持にはc-SMACから解離し、その周囲にCD28を中心とするクラスーを形成することを明らかにした。このことは、TCR刺激のみならず副刺激もCD28-TCRマイクロクラスーとしてのシグナルソームを単位として伝達されていることを示唆している。

在两个细胞的接触表面形成的“免疫突触”被称为在T细胞和抗原呈递细胞之间交换信息的地方。免疫神经酶是由中央位点C-SMAC（中央 - 苏普拉分子激活簇）构建的，其中收集了T细胞受体（TCR），并在其中收集了粘附分子的外周三位点P-SMAC P-SMAC（外围 - SMAC）。到去年，我们已经构建了一个复杂的刨膜法和总反射荧光显微镜的复杂实验系统，并观察到，当T细胞接触抗原呈递细胞和plan膜膜时，TCR会形成50-100聚集体（TCR显微群体），然后移动到接触表面以形成C-Smacs的中心。还揭示了每个群集具有与之相关的激活信号分子，并且单个TCR微簇本身充当信号体，并负责激活和维持T细胞激活（Nat。Immunol。：6,1253,2005）。另一方面，已经提出，不仅刺激TCR，而且还需要来自CD28等共刺激分子的信号才能完全激活和维持T细胞。今年，我们将CD80分子（CD28的配体）引入了Planer膜法，并分析了T细胞中抗原识别过程中CD28分子的行为。结果，据表明，在诱导的激活的早期，CD28在TCR微聚类中进行了共定位，同时保持了与C-SMAC的激活分离，形成了以其CD28为中心的类。这表明，不仅TCR刺激，而且共刺激作为信号单位传播为CD28-TCR微类。