プレーナーメンブランを用いた細胞傷害性T細胞の自己認識機構の解明

使用平面膜阐明细胞毒性 T 细胞的自我识别机制

基本信息

批准号：
17790330
负责人：
横須賀忠
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

T細胞と抗原提示細胞との情報交換の場として、2つの細胞の接触面に形成される「免疫シナプス」が知られている。免疫シナプスは、T細胞受容体(TCR)が集まる中心部位c-SMAC(central-supra molecular activation cluster)と、接着分子が集まる周辺部位p-SMAC(peripheral-SMAC)から構築される。昨年度までにわれわれは、プレイナーメンブレン法と全反射蛍光顕微鏡との複合実験系を構築し、T細胞が抗原提示細胞およびプレイナーメンブレンと接触する際、TCRが50-100からなる集合体(TCRマイクロクラスター)を形成し、以後、それらが接触面の中央に移動しc-SMACを形成することを観察した。また各々のクラスターには活性化シグナル伝達分子が会合しており、個々のTCRマイクロクラスター自身がシグナルソームとして働き、T細胞活性化の発動と維持を担っていることを明らかにした(Nat.Immunol.:6,1253,2005)。一方、T細胞の完全な活性化やその維持には、TCRからの刺激だけでなく、CD28を始めとする副刺激分子からのシグナルが必要であると提唱されてている。今年度、われわれは、CD28のリガンドであるCD80分子をプレイナーメンブレン法に導入し、T細胞の抗原認識の際の、CD28分子の挙動を解析した。その結果、活性化が惹起される初期には、CD28がTCRマイクロクラスターに共局在する一方、活性化の維持にはc-SMACから解離し、その周囲にCD28を中心とするクラスーを形成することを明らかにした。このことは、TCR刺激のみならず副刺激もCD28-TCRマイクロクラスーとしてのシグナルソームを単位として伝達されていることを示唆している。

“免疫突触”形成于 T 细胞和抗原呈递细胞之间的界面，被认为是两个细胞之间信息交换的场所。免疫突触由 T 细胞受体 (TCR) 聚集的中央 c-SMAC（中央超分子激活簇）和粘附分子聚集的外周 p-SMAC（外周-SMAC）构成。到去年，我们构建了一个结合平面膜法和全内反射荧光显微镜的组合实验系统，我们观察到微团簇形成，然后它们移动到接触表面的中心形成c-SMAC。此外，据揭示，激活信号转导分子与每个簇相关，并且每个TCR微簇本身充当信号体并负责触发和维持T细胞激活(Nat.Immunol.:6,1253,2005)。另一方面，有人提出，T细胞的完全激活和维持不仅需要TCR的刺激，还需要来自CD28等共刺激分子的信号。今年，我们将CD28的配体CD80分子引入平面膜方法中，分析了CD28分子在T细胞识别抗原过程中的行为。结果表明，CD28 在激活的早期阶段与 TCR 微簇共定位，而为了维持激活，它与 c-SMAC 分离并形成以 CD28 为中心的簇。这表明不仅 TCR 刺激而且共刺激都是使用信号体作为 CD28-TCR 微类来传递的。