Ror2受容体型チロシンキナーゼによる細胞運動の制御機構

Ror2受体酪氨酸激酶控制细胞运动的机制

• 批准号: 17790211
• 负责人: 西田 満
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790211/
• 关键词: Ror; Wnt; Dvl; リン酸化; filamin; アクチン細胞骨格

Wnt5aシグナル伝達系におけるRor2の役割を調べるため、Ror2を発現していないL細胞とRor2を発現しているNIH3T3細胞を用い、それらのWnt5aに対する応答性を比較した。Wntシグナルの活性化は細胞内シグナル伝達因子Dvlのリン酸化を誘導するため、Wnt5aに対する応答性はDvlのリン酸化を検出することによって評価した。解析の結果、NIH3T3細胞ではWnt5a刺激によってDvlがリン酸化されるのに対し、L細胞ではRor2の強制発現依存的にDvlがリン酸化された。したがって、Ror2の発現がWnt5aによるDvlのリン酸化に重要な役割を果たしていることが示唆された。次にRor2遺伝子欠損マウス胚(Ror2-/-)および野生型マウス胚(Ror2+/+)より単離した胚性線維芽細胞(MEF)を用いてWnt5a刺激によるDvlのリン酸化動態の解析を行った。その結果、Ror2+/+MEFにおいてはWnt5a刺激依存的にDvlのリン酸化が認められたのに対し、Ror2-/-MEFにおいてはそのリン酸化は認められなかった。したがってRor2はWnt5aによるDvlのリン酸化に必要であることが明らかになった。Dvlのリン酸化はWnt5aのほか、異なるタイプのWntであるWnt3aなどによっても引き起こされることが知られている。そこでWnt3aを用いて同様の解析を行った結果、Ror2+/+MEFとRor2-/-MEFにおいてWnt3a刺激によるDvlのリン酸化が同様に検出された。したがって、Ror2はWnt3aによるDvlのリン酸化には必要ではないことが明らかとなった。本研究からRor2はWnt5a特異的なDvlリン酸化制御を担っていることが明らかになった。

为了研究ROR2在WNT5A信号系统中的作用，使用表达ROR2的ROR2和NIH3T3细胞的L细胞用于比较其对WNT5A的响应能力。由于Wnt信号的激活诱导细胞内信号传导因子DVL的磷酸化，因此通过检测DVL的磷酸化来评估对Wnt5a的响应。分析的结果是，DVL在NIH3T3细胞中被Wnt5a磷酸化，而DVL在L细胞中的强制表达中取决于ROR2的L细胞中磷酸化。因此，有人提出ROR2表达在WNT5A的DVL磷酸化中起重要作用。接下来，通过WNT5A刺激分析了从ROR2缺陷小鼠胚胎（ROR2 - / - ）和野生型小鼠胚胎（ROR2+/+）分离的胚胎成纤维细胞（MEF）。结果，在ROR2+/+MEF中以Wnt5a刺激依赖性方式观察到DVL磷酸化，而在ROR2 - / - MEF中未观察到这种磷酸化。因此，已经揭示了Wnt5a对DVL的磷酸化所必需的ROR2。众所周知，DVL的磷酸化是由Wnt5a以及不同类型的WNT3A引起的。因此，使用WNT3A进行了类似的分析，在ROR2+/+MEF和ROR2 - / - MEF中检测到Wnt3a对DVL的类似磷酸化。因此，已经揭示了ROR2对于Wnt3a的DVL磷酸化不是必需的。这项研究表明，ROR2负责WNT5A特异性DVL磷酸化调节。

项目成果

Filopodia formation mediated by receptor tyrosine kinase Ror2 is required for Wnt5a-induced cell migration.

• DOI: 10.1083/jcb.200607127
• 发表时间: 2006-11-20
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Nishita M;Yoo SK;Nomachi A;Kani S;Sougawa N;Ohta Y;Takada S;Kikuchi A;Minami Y
• 通讯作者: Minami Y

Spatial and temporal regulation of cofilin activity by LIM kinase and Slingshot is critical for directional cell migration.

• DOI: 10.1083/jcb.200504029
• 发表时间: 2005-10-24
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Nishita M;Tomizawa C;Yamamoto M;Horita Y;Ohashi K;Mizuno K
• 通讯作者: Mizuno K