白血病・前白血病細胞の増殖機構と抗腫瘍剤およびサイトカインによるその制御の研究

白血病/白血病前期细胞增殖机制及其抗肿瘤药物和细胞因子调控的研究

基本信息

批准号：
05770800
负责人：
通山薫
金额：
$ 0.58万
依托单位：
福井医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

项目摘要

前白血病状態と考えられている骨髄異形成症候群(MDS)に対するサイトカイン療法の有効性と安全性を調べるために以下の実験を行なった。即ちMDS患者19例(低リスクMDS群8例,高リスクMDS群6例,白血病移行群5例)および健常者4例の骨髄(一部末梢血)細胞から、免疫磁性ビーズ法にてCD34陽性分画を分離してG-CSFまたはGM-CSF存在下に7日間液体培養後、芽球の動態をインビトロで観察した。その結果各群ともCSF存在下で細胞数が増加したが、健常者群で芽球割合が低下して順調に分化成熟していったのに対して、MDS各群、とくにリスクの高い群では芽球がCSFによって著増した2例を含めて、芽球の残存傾向が見られた。培養前後に核型分析を施行し得た4例のMDSでは、異常核型のクローンがインビトロでCSFによって支持されていた。従ってとくに芽球割合の多い病型では、CSFによってさらに芽球の増加をきたす可能性が考えられた。次にMDS細胞の長期培養に取り組み、長期培養細胞株が得られたので報告する。患者は、RARSの52歳男性で、白血病化をみることなく出血傾向にて死亡した。生前の患者骨髄よりIL-3依存性細胞株MDS92が樹立された。MDS92は現在まで19カ月にわたって継代されている。形態上は芽球様細胞から成熟好中球・単球様細胞まで混在しており、IL-3、GM-CSFまたはSteel factor存在下で増殖し、種々のミエロイドコロニーを形成した。核型分析の結果、クローナルに5番,7番染色体の欠先を含む複雑な異常を認め、またN-ras遺伝子解析にてコドン12にGGT→GCTの点突然変異が検出された。以上よりMDS92は前白血病状態の特徴を反映するユニークな細胞株と考えられ、今後本細胞株用いて分子・細胞生物学的解析を予定している。

进行以下实验是为了研究细胞因子疗法对骨髓增生异常综合征（MDS）的有效性和安全性，MDS被认为是白血病前期病症。具体而言，19 名 MDS 患者（低危 MDS 组 8 名，高危 MDS 组 6 名，白血病转化组 5 名）和 4 名健康受试者的骨髓（部分外周血）细胞 CD34 阳性，使用免疫磁珠法分离流分，在G-CSF或GM-CSF存在下液体培养7天，体外观察母细胞动态。结果，在脑脊液存在的情况下，各组中细胞数量增加，但健康组中原始细胞的百分比减少，并且它们分化和成熟顺利，而在各MDS组中，尤其是高危组A中。观察到母细胞有残留的倾向，其中有2例因CSF而导致母细胞数量显着增加。在培养前后可进行核型分析的4例MDS病例中，核型异常的克隆均得到CSF体外支持。因此，特别是在母细胞比例较高的疾病类型中，认为脑脊液可能进一步增加母细胞数量。接下来，我们对MDS细胞进行了长期培养，并报道我们获得了长期培养的细胞系。该患者是一名 52 岁男性，患有 RARS，因出血倾向而死亡，并未发展为白血病。 IL-3依赖性细胞系MDS92是从患者死前的骨髓中建立的。 MDS92 迄今已通过 19 个月。它们的形态是胚细胞到成熟中性粒细胞/单核细胞样细胞的混合物，并且它们在IL-3、GM-CSF或Steel因子存在下增殖，形成各种骨髓集落。核型分析揭示了复杂的克隆异常，包括 5 号和 7 号染色体缺失，N-ras 基因分析检测到 12 号密码子处存在 GGT→GCT 点突变。综上所述，MDS92被认为是一种反映白血病前期特征的独特细胞系，我们计划未来利用该细胞系进行分子和细胞生物学分析。