ヒト肝癌細胞由来血管新生物質の同定と分析

人肝癌细胞来源的血管生成物质的鉴定与分析

• 批准号: 05770357
• 负责人: 加藤 淳二
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770357/
• 关键词: 肝細胞癌; 培養細胞; 血管新生因子

固形腫瘍組織の発育増殖には栄養血管の構築が必須であり,特に肝細胞癌では顕著な毛細血管網の新生を来たし,これには肝細胞癌由来の血管誘導物質が重要であると考えられるが,その詳細は明らかにされていない。本研究では培養ヒト肝細胞癌株であるHUH-6,HUH-7,PLC/PRF/5,HLE,HLF,およびHepG2のcell extractを用いて,牛副腎由来毛細血管内皮細胞(BCEC)の増殖を刺激する活性の有無を,トリチウムチミジンの取り込みでを検討した。その結果,特にHLEのcell extract中にBCECの増殖を対照の約5倍刺激する活性が存在することが明らかとなった。また、このHLE細胞由来のBCEC増殖刺激活性は,80℃,10分間の加熱処理により失活し,蛋白質である可能性が考えられた。この活性はheparin-Sepharose beadsに吸着されず,heparin非結合性であると考えられる。また,HLEのcell extract中には線維芽細胞の増殖を誘導する活性も含まれており,血管内皮細胞増殖活性のさらなる精製,分析が必要であると考えられる。現在すでに入手可能となっている血管新生因子の中和抗体による中和試験ならびに,家兎眼球結膜を用いてin vivoにおける血管新生作用の有無につき検討中である。今後,HPLCなどで本生理活性物質の精製,分析を予定している。

营养血管的构建对于实体瘤组织的生长和增殖至关重要，特别是在肝细胞癌中，发生显着的毛细血管网络形成，并且来自肝细胞癌的血管诱导剂被认为对此很重要。没有被披露。在这项研究中，我们使用培养的人肝细胞癌细胞系 HUH-6、HUH-7、PLC/PRF/5、HLE、HLF 和 HepG2 的细胞提取物来增殖牛肾上腺来源的毛细血管内皮细胞 (BCEC)。研究了氚胸苷以确定其是否具有任何刺激活性。结果显示，HLE 细胞提取物尤其具有刺激 BCEC 增殖的活性，约为对照的 5 倍。此外，这种源自 HLE 细胞的 BCEC 增殖刺激活性通过 80°C 热处理 10 分钟而失活，表明它可能是一种蛋白质。该活性不被肝素-琼脂糖珠吸附，并且被认为是非肝素结合。此外，HLE细胞提取物含有诱导成纤维细胞增殖的活性，认为有必要进一步纯化和分析血管内皮细胞增殖活性。我们目前正在使用现有的血管生成因子中和抗体进行中和试验，并使用兔眼结膜检查体内是否存在血管生成效应。今后，我们计划利用HPLC等方法对该生理活性物质进行纯化和分析。