胸腺上皮細胞におけるタイトジャンクション構成因子の発現とその組識構築における役割

胸腺上皮细胞紧密连接组成因子的表达及其在组织结构中的作用

基本信息

批准号：
16790286
负责人：
濱崎洋子
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790286/
关键词：
胸腺上皮細胞タイトジャンクション

项目摘要

・胸腺髄質に存在するクローディン陽性上皮細胞の機能これまでに、胸腺上皮細胞が通常の上皮組織に認められる細胞シートを形成しないにも関わらず、髄質の一部の胸腺上皮細胞のみがタイトジャンクション(TJ)を形成するクローディン(Cld)を発現することを明らかにしてきた。今回、CldをFACSにて標識する実験系を確立し、Cld陽性胸腺上皮細胞における遺伝子発現を検討した。その結果、これらの細胞は成熟胸腺において補助刺激分子やClassIIおよび末梢自己抗原の胸腺内における発現制御に関与するAuto immune regulator(Aire)遺伝子を高発現し、末梢自己抗原の免疫寛容の成立に重要な役割を果たす上皮細胞であることが明らかになった。さらに、このCld陽性胸腺髄質上皮細胞は、胸腺髄質形成の異常と自己免疫を呈するnik mutantマウス及びTRAF6欠損マウスにおいて消失していることから、これらのシグナル依存性に発生することが示された。現在、この特殊に機能分化した胸腺上皮細胞に発現するクローディンの機能について解析を行っている。・Aire陽性細胞の発生起源に関する検討自己免疫寛容の成立に関与するクローディン陽性胸腺上皮細胞の発生メカニズムを明らかにするために、Cldの発現をマーカーとして胸腺発生過程を継時的に観察した。その結果、重層上皮層の組織形態をとる胸腺原基の最もアピカル側の細胞がすでにTJ構成因子を発現し、これらの細胞がリンパ球前駆細胞の侵入と共に胸腺原基内に島状に分散して胸腺髄質領域のコアを形成すること、またその後、補助刺激分子等の機能分子の発現を上昇させることが明らかになった。現在、各発生過程の胸腺から回収したCld陽性細胞の遺伝子発現の変化を継時的に検討することにより、髄質上皮細胞の機能分化に関与する遺伝子群の同定を進めている。

・胸腺髓质中密蛋白阳性上皮细胞的功能据报道，尽管胸腺上皮细胞不形成正常上皮组织中所见的细胞片，但只有髓质中的一些胸腺上皮细胞表现出紧密连接。表达形成（TJ）的密蛋白（Cld）。在这里，我们建立了使用 FACS 标记 Cld 的实验系统，并研究了 Cld 阳性胸腺上皮细胞中的基因表达。因此，这些细胞高度表达自身免疫调节因子（Aire）基因，该基因参与控制成熟胸腺中共刺激分子、II类和外周自身抗原的表达，对于建立免疫系统具有重要意义。对外周自身抗原的耐受性已经明确，这些上皮细胞发挥着重要作用。此外，这些Cld阳性胸腺髓质上皮细胞在nik突变小鼠和TRAF6缺陷小鼠中消失，表现出异常的胸腺髓质形成和自身免疫，表明它们的发育依赖于这些信号。我们目前正在分析这些特殊功能分化的胸腺上皮细胞中表达的密蛋白的功能。 - 检查Aire阳性细胞的发育起源为了阐明参与自身免疫耐受建立的claudin阳性胸腺上皮细胞的发育机制，我们使用Cld表达作为标记物观察了随时间变化的胸腺发育过程。结果表明，具有分层上皮层组织学的胸腺原基的最顶端细胞已经表达TJ组成因子，并且这些细胞随着淋巴祖细胞的侵入而分散在胸腺原基内的岛中。胸腺形成胸腺髓质区域的核心，随后增加共刺激分子等功能分子的表达。我们目前正在通过检查从不同发育阶段的胸腺收集的 Cld 阳性细胞的基因表达随时间的变化来识别参与髓质上皮细胞功能分化的基因组。