新奇Rhoファミリータンパク質による頭部形成の制御機構の解析

新型Rho家族蛋白控制头部形成的机制分析

基本信息

批准号：
16770164
负责人：
鈴木厚
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770164/
关键词：
豆部形成初期発生アフリカツメガエルシグナル伝達

项目摘要

研究代表者は頭尾軸および背腹軸の形成機構を解明することを目的として、アフリカツメガエル胚を用いた発現クローニング法をおこない、頭部の形成を阻害する遺伝子を単離した。この遺伝子は細胞骨格の制御に重要な役割を果すRhoファミリーに属する新奇の遺伝子であり、頭部形成を阻害することからkao-nashi(kash)と名付けた。kash遺伝子は、原腸胚期の原口上唇部に強く発現しており、神経胚期には頭部外胚葉部分、特に将来の神経堤細胞領域に発現の局在が認められることから、外胚葉細胞の分化・移動に関与する可能性が考えられた。本研究では、(1)過剰発現および機能阻害実験によって頭部外胚葉形成におけるkash遺伝子の機能を明らかにすること、(2)酵母Two-hybridスクリーニング法によってkashタンパク質と結合するタンパク質を同定し、初期胚におけるkashタンパク質の作用機構および活性制御機を解析すること、(3)神経堤細胞領域におけるkash遺伝子の発現制御機構を解析することを主な目的とした。これまでに、(1)Kashの過剰発現によって、神経堤細胞マーカーの発現領域が拡大すること、(2)酵母Two-hybridスクリーニング法によって単離されたkash結合タンパク質にはアクチン制御タンパク質に関連した遺伝子群が複数含まれていること、(3)神経堤細胞の形成に関与するWntシグナルによって、Kash遺伝子の発現が誘導されることが明らかになった。今後は、kash遺伝子のより詳細な機能阻害実験、およびkash結合タンパク質の機能解析を中心に研究をおこなう予定である。

主要研究者使用爪蟾胚胎进行了一种表达克隆方法，以分离尾尾轴和背腹轴的机理，以及抑制头部形成的分离基因。该基因是属于Rho家族的新基因，在细胞骨架调节中起着重要作用，并被称为Kao-Nashi（Kash），因为它抑制了头部的形成。 kash基因在原始阶段的上唇中强烈表达，并且在头部外胚层部分中表达的定位，尤其是在未来的神经crest细胞区域，被认为参与了外胚层细胞的分化和迁移。 The main objectives of this study were (1) to clarify the function of the kash gene in ectoderm formation in the formation of the head by overexpression and function inhibition experiments, (2) to identify proteins that bind to kash proteins by yeast Two-hybrid screening, and to analyze the mechanism of action and activity control of kash proteins in the early embryo, and (3) to analyze the mechanism of expression and regulation of Kash基因神经rest细胞区域。到目前为止，已经揭示了（1）KASH的过表达扩大了神经Crest细胞标记的表达区域，（2）通过酵母两杂化筛选分离的Kash结合蛋白包含多个与肌动蛋白调节的蛋白有关的基因，并且（3）与Neural Crest Cells相关的WNT信号涉及Neural Crest Cells的形成是Kash Genes in kash Genes的表达。将来，我们计划进行研究，重点是Kash基因的更详细的功能抑制实验和Kash结合蛋白的功能分析。