神経細胞増殖・分化におけるヒストン脱アセチル化酵素Sirの役割

组蛋白脱乙酰酶 Sir 在神经元增殖和分化中的作用

• 批准号: 15700261
• 负责人: 久原 真
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15700261/
• 关键词: ヒストン脱アセチル酵素; Sir2α(SIRT1); 神経幹細胞; Neuroshere assay; 増殖; 分化; Subventricular zone; ヒストン脱アセチル化酵素; Sir(silent information regulator); neurosphere assay; splitomicin; sirtinol

1)ヒストン脱アセチル化酵素Sir2α(SIRT1)の中枢神経系における発現成体マウス中枢神経における発現細胞の同定を行うため免疫染色を試みた。SIRT1は側脳室のsubventricular zone(SVZ)に発現が豊富でnestin陽性細胞でも発現していることから神経幹細胞を含む未分化神経系細胞である可能性があった。そこでさらに各種マーカーとの多重染色を試みSVZ領域のtype B, C, A細胞と上衣細胞に発現していることが明らかとなった。SIRT1はrostral migratory stream(RMS)や嗅球におけるPSA-NCAM陽性細胞や海馬歯状核のnestin陽性細胞には発現が無くSVZ周辺の未分化細胞に限局した発現と考えられた。2)Neurosphere assayにおけるSIRT1機能の解析胎生14日目の胎児脳から線条体組織を培養して実験を行った。培地中にSIRT1の阻害剤であるnicotinamide, splitomicin, sirtinolなどを培地に投与するとneurosphereの成長が阻害されたが非投与群に対して細胞死の割合は増加していなかった。またこれらのsphereを血清を含んだ培地に移し人為的にneuron, oligodendrocyte, astrocyteへ分化させる際にこれらの阻害剤を投与する実験も行った。その結果阻害剤投与でneuron, oligodendrocyteを含有したneurosphereが著明に減少した。これらよりSIRT1が神経幹細胞の増殖や分化に重要な役割を果たすと考えられた。

1）试图在组蛋白脱乙酰基酶SIR2α（SIRT1）的中枢神经系统中表达的成年小鼠中枢神经系统中的中枢神经系统中鉴定出表达的细胞。由于SIRT1在侧心室的室室（SVZ）中含量丰富，并且在Nestin阳性细胞中也表达，因此它可能是一个未分化的含有神经干细胞的神经系统细胞。此外，尝试使用各种标记物进行多种染色，并发现它在SVZ区域的B型，C，A和室室室室细胞中表达。 SIRT1未在海马齿状核中的鼻迁移流（RMS）或PSA-NCAM阳性细胞或巢蛋白阳性细胞中表达，被认为是局部在SVZ周围未分化的细胞。 2）在神经球测定中的SIRT1功能分析该实验是在胎儿生命的第14天通过从胎儿脑中培养纹状体组织进行的。将SIRT1抑制剂（例如烟酰胺，裂菌素，Sirtinol等）施用到培养基中的培养基抑制剂中抑制了神经圈的生长，但是非限制组的细胞死亡率并未增加。此外，进行了实验，其中将这些球转移到含血清的培养基中，并在人为分化为神经元，少突胶质细胞和星形胶质细胞中时施用抑制剂。结果，抑制剂给药导致含有神经元和少突胶质细胞的神经球的显着降低。从这些结果中，人们认为SIRT1在神经干细胞增殖和分化中起着重要作用。

项目成果

Shin Hisahara: "Effects of histone deacetylase Sir2α on proliferatin and differentiation of neural stem cells"Society for Neuroscience, Abst.. 29. 242.12 (2003)

Shin Hisahara：“组蛋白脱乙酰酶 Sir2α 对神经干细胞增殖和分化的影响”Society for Neuroscience，Abst.. 29. 242.12 (2003)

堀尾嘉幸: "SIR2の分子機能解析"日本薬理学雑誌. 122・補完1. 30-32 (2003)

Yoshiyuki Horio：“SIR2 的分子功能分析”日本药理学杂志 122/增刊 1. 30-32 (2003)。

Yoshiyuki Horio: "Expression of SIR3, a homolog of NAD-dependent histone deacetylase, in the brain."Jpn.J.Pharmacol.. 88・suppll1. 200 (2002)

Yoshiyuki Horio：“NAD依赖性组蛋白脱乙酰酶同源物SIR3在大脑中的表达。”Jpn.J.Pharmacol.. 88·suppll1. (2002)

Caspase-mediated oligodendrocyte cell death in the pathogenesis of autoimmune demyelination

• DOI: 10.1016/s0168-0102(03)00127-5
• 发表时间: 2003-08-01
• 期刊: NEUROSCIENCE RESEARCH
• 影响因子: 2.9
• 作者: Hisahara, S;Okano, H;Miura, M
• 通讯作者: Miura, M

堀尾嘉幸: "老化の分子レベルでの解明-NAD依存性ヒストン脱アセチル化酵素SIR2"札幌医学雑誌. 71・3-4. 13-18 (2002)

堀尾义之：“从分子水平阐明衰老——NAD依赖性组蛋白脱乙酰酶SIR2”札幌医学杂志71・3-18（2002年）。