分子生物学的手法を用いた胎盤増殖・抑制因子の解明及び子宮内胎児発育遅延病態の解析

利用分子生物学方法阐明胎盘生长/抑制因素并分析宫内生长迟缓病理学

• 批准号: 15790901
• 负责人: 鈴森 伸宏
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790901/
• 关键词: 分子生物学; 胎盤; 増殖・抑制因子; 子宮内胎児発育遅延; 胎児異常; ELISA; 出生前診断; 胎児血

本研究は名古屋市立大学大学院ヒトゲノム倫理委員会へ申請し、平成15年12月に承認を得ている。充分なインフォームドコンセントののち、経膣または帝王切開分娩後の胎盤絨毛検体(子宮内胎児発育遅延5症例、正常5症例)よりそれぞれmRNAを抽出し、昨年に引き続きクローンテック社のcDNA subtractionキットを用いて、dT primerにてcDNAを合成して、一本鎖cDNAと二本鎖cDNAを合成した。続いて、子宮内胎児発育遅延症例の検体由来の二本鎖cDNAにAdaptorをつけて、両方の検体由来の二本鎖cDNAを2日間Hybridizationさせた。PCR続いてNested PCRを行ってアガロースゲルで電気泳動した。cDNA subtractionされたものが検出される。しかし、胎盤増殖・抑制因子に関係すると思われる遺伝子の明らかな発現を認めなかったため、現在は再びNCBI(National Center for Biotechnology Information)homepageで子宮内胎児発育遅延に有意に発現を認めるクローンを検索中である。本研究開始より約2年を経て、当科で分娩された症例において、分娩中あるいは術中に臍帯静脈より胎児血を採取し、子宮内胎児発育遅延22症例、妊娠高血圧腎症合併子宮内胎児発育遅延11症例、コントロール26症例を血清分離してフリーザーに保存しており、有意に血管増生に関与している因子をELISA法で分析する方針である。それらの因子が発見出来れば、子宮内の胎児-胎盤発育に関与している可能性が示唆される。また、我々は過去の症例を解析し妊娠初期発症の妊娠高血圧腎症合併の子宮内胎児発育遅延症例の母体血清で、有意にインヒビン濃度が上昇していることを本年度に報告した。今後、母体血清においても、子宮内胎児発育遅延症例で有意に上昇する因子を調べ、早期診断や疾患の予知に有用か否かを分析していく方針である。我々は昨年度に重篤な子宮内胎児発育遅延を認める症例を経験し、それが胎児異常を認め、出生前診断により9番トリソミーであり、子宮内胎児発育と関連していることを症例報告した。本年度は非常に稀な胎児に結合体という胎児異常がある症例2例の出生前診断を報告した。今後、更に胎児異常症例においても詳しく解析し、報告していく方針である。

这项研究应用于纳戈亚市大学人类基因组伦理研究生院的人类基因组伦理委员会，并于2003年12月获得批准。在足够的知情同意后，从胎盘绒毛标本中提取mRNA，使用阴道或cestna syn syn synsress synsress synsress synerstress synsress synsress synsress synsress synsress从胎盘绒毛绒毛标本中提取mRNA。合成了Clontech和单链cDNA。随后，与适配器相连的宫内胎儿生长病例标本的双链cDNA，并允许两个标本的双链cDNA杂交两天。 PCR随后是嵌套的PCR，并在琼脂糖凝胶上电泳。检测到那些被减去的人。但是，由于已经观察到与胎盘生长/抑制因子有关的基因的明显表达，因此我们目前正在搜索NCBI（国家生物技术中心国家生物技术中心）主页的NCBI（国家生物技术信息中心）在NCBI（国家生物技术信息中心）中的明显表达的克隆。在本研究开始后大约两年后，在分娩或手术期间，在我们部门的分娩过程中，从脐静脉中收集胎儿血液，以及血清分离的22例宫内胎儿胎儿生长延迟，11例患有宫内胎儿胎儿胎儿的生长迟缓，前宾夕法尼亚州的前lamp病例和对照病例的26例。该计划是为了分析使用ELISA方法显着参与血管增殖的因素。如果可以发现这些因素，则表明它们可能参与子宫内的胎儿置换发育。我们还分析了过去的病例，并报道今年报告说，抑制素浓度在宫内胎儿生长的孕产妇血清中显着增加，病例降低了妊娠和先兆子痫早期发作。将来，该计划是研究子宫内胎儿生长延迟的孕产妇血清的因素，并分析它们是否对早期诊断和预测疾病有用。去年，我们报道了一例严重的宫内胎儿生长迟钝的病例，该病例显示出胎儿异常和三体术的产前诊断，这与宫内胎儿胎儿发育有关。今年，我们报道了两例胎儿异常病例的产前诊断，这些病例极为罕见。将来，我们计划进一步分析和报告胎儿异常。

项目成果

Suzumori N, et al.: "Prenatal findings for complete trisomy 9."Prenatal Diagnosis. 23・10. 866-868 (2003)

Suzumori N 等：“完全三体性 9 的产前检查”。产前诊断 23・10（2003 年）。