Charakterisierung des ADP-ribosylierenden Bacillus sphaericus Toxins MTX

ADP-核糖基化球形芽孢杆菌毒素 MTX 的表征

• 批准号: 5336938
• 负责人: Professor Dr. Klaus Aktories
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung I
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5336938?language=en
• 关键词: Charakterisierung; des; ADP; ribosylierenden; Bacillus

Bacillus sphaericus produziert ein 97 kDA ADP-ribosylierendes Toxin (MTX), das moskitozidale Eigenschaften hat. Das Toxin ist von besonderem pharmakologischem und toxikologischem Interesse, weil es sowohl in Insekten- als auch in Säugetierzellen zytotoxische und zytopathische Eigenschaften hat. Das Toxin wird proteolytisch aktiviert, wobei ein N-terminales ~27 kDA und ein C-terminales ~70 kDA Fragment entstehen. Das 27 kDa Fragment besitzt ADP-Ribosyltransferase-Aktivität und modifiziert in vitro zahlreiche Proteine im Zytosol von Insekten- und Säugetierzellen. Das 70 kDA Fragment ist wahrscheinlich für die Zellbindung und die Aufnahme des Toxins in die Zelle verantwortlich. In dem vorliegenden Antrag soll die Enzymaktivität des Toxins biochemisch charakterisiert und die eukaryonten Zielsubstrate der bakteriellen ADP-Ribosyltransferase identifiziert werden. Es wird ein Fusionstoxin konstruiert, das aus der katalytischen Domäne der ADP-Ribosyltransferase von B. sphaericus und dem Zelltransportsystem von Clostridium botulinum C2 Toxin besteht. Mit Hilfe des Zelltransportsystems sollen die zytotoxischen und zellulären Wirkungen von MTX in verschiedenen Zelltypen (Insektenzellen und Säugetierzellen) untersucht werden. Schließlich soll die Interaktion der 27 kDA Enzymdomäne des B. sphaericus Toxins mit der putativen 70 kDa Bindungs- und Transportdomäne, die zu einer Inhibiton der Enzymaktivität führt, charakterisiert werden.

球形芽孢杆菌生产 97 kDA ADP-核糖基毒素 (MTX)，das moskitozidale Eigenschaften hat。毒素具有蛋白水解活性，在 N 末端 ~27 kDA 和 C 末端 ~70 kDA 片段内。 Zytosol von Insekten- 和 Säugetierzellen。 Das 70 kDA 片段是 Zelle verantwortlich 中的 Zellbindung 和 Aufnahme des Toxins 的 wahrscheinlich。球形芽孢杆菌和肉毒杆菌 C2 毒素最佳转运系统的 ADP-核糖基转移酶。 Zelltransportsystems sollen die zytotoxischen und zellulären Wirkungen von MTX in verschiedenen Zelltypen (Insektenzellen und Säugetierzellen) undersucht werden.绑定和运输领域，是酶活性抑制的关键，特征在于。