先天色覚異常および保因者の遺伝子診断法の確立

先天性色盲及携带者基因诊断方法的建立

基本信息

批准号：
14770979
负责人：
林孝彰
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

目的:本研究は、日本人先天赤緑異常およびその保因者の遺伝子診断法を確立し、心理物理学検査と遺伝子型関連性を見つけ出すことを目的としている。方法:まず当科専門外来で、仮性同色表、Pane1-D15、アノマロスープで先天赤緑異常と診断された女子や男子と保因者であるその母親を抽出した。研究は、学内倫理委員会で承認された計画書に基づき行われた。インフォームド・コンセントを得た後、末梢静脈血より高分子ゲノムDNAを抽出した。発端者である第1異常8例(女子1例を含む)とその母親、第2異常5例とその母親に対し、PCR-SSCP法、Long-range PCR法および直接塩基配列決定法により遺伝子型を決定した。結果:第1異常男子の発端者全例で正常赤視物質遺伝子が緑視物質遺伝子に類似した赤緑融合遺伝子に置き換わっていた。絶対保因者においても、Long-range PCR法により赤緑融合遺伝子を検出した。また、第1異常女子の遺伝子型を第1色盲の弟と第1色弱の父親の遺伝子型の決定によって同定することができた。第2異常の発端者5例で正常赤視物質遺伝子に加え赤視物質遺伝子に類似した緑赤融合遺伝子の存在が確認された。その3例で正常緑視物質遺伝子も存在していた。2例では、正常赤視物質遺伝子のみが認められ、正常緑遺伝子や緑赤融合遺伝子は、検出されなかった。第2異常の保因者では、緑赤融合遺伝子を有するものではその存在を確認できた。考按:本法によって、第1異常とその保因者は100%検出可能であることが示唆された。一方。第2異常の遺伝子配列決定は可能であったが、遺伝子種類の複雑性から保因者の遺伝子型決定には、最末端の視物質遺伝子の同定が不可欠と考えられた。先天色覚異常女子の遺伝子型は、家系調査によって同定できる可能性がある。今後は、先天色覚異常女子の遺伝子型と表現型についても症例を重ね検討していきたい。

目的：本研究旨在建立日本先天性红绿色异常及其携带者的基因诊断方法，并找出心理物理测试与基因型之间的关系。方法：首先，我们选择在我们的专科门诊根据假等色图、Pane 1-D15和异常汤诊断为先天性红绿色异常的女孩和男孩及其携带者的母亲。该研究是根据大学伦理委员会批准的协议进行的。获得知情同意后，从外周静脉血中提取高分子量基因组DNA。采用PCR-SSCP、长链PCR和直接核苷酸测序技术对先证者、8例首次异常病例（其中1例为女性）及其母亲、5例二次异常病例及其母亲进行了基因分型。已决定。结果：所有首例异常男性先证者中，正常红光物质基因被与绿光物质基因类似的红绿融合基因所取代。即使在专性携带者中，也可以通过长程 PCR 检测到红绿融合基因。此外，我们能够通过确定患有原发性色盲症的弟弟和患有原发性色盲症的父亲的基因型来鉴定患有原发性色盲症的女性的基因型。除了正常的红光物质基因外，在5名继发性异常的先证者中还证实存在与红光物质基因类似的绿红融合基因。在其中三个病例中，还存在正常的绿色光学物质基因。两例仅检测到正常红光物质基因，未检测到正常绿色基因和绿红融合基因。在第二种异常的携带者中，确认了绿红融合基因的存在。讨论：有人认为该方法可以100%检测出原发性异常及其携带者。另一方面。可以对第二个异常的基因进行测序，但由于基因类型的复杂性，最远端光学物质基因的鉴定被认为对于确定携带者的基因型至关重要。先天性色盲女孩的基因型可以通过家庭研究来确定。未来，我们希望通过重复的案例研究，研究先天性色盲女孩的基因型和表型。