魚類のウイルス抗原特異的細胞傷害能に関する研究

鱼类病毒抗原特异性细胞毒性研究

基本信息

批准号：
03J02019
负责人：
杣本智軌
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Fisheries Research Agency
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はクローンギンブナ(S3n)とS3n由来株化細胞を用いることにより、ウイルス感染細胞に対する抗原特異的な細胞傷害活性(CTL様活性)の誘導に成功している。本研究では、この抗原特異的細胞傷害活性を有するエフェクター細胞の性状を明らかにするため、(1)ギンブナT細胞マーカーの同定、及び(2)ウイルス特異的CTL様活性とT細胞マーカーの発現量との相関を調べた。(1)まず、我々はCTLの重要な表面マーカーとして知られているT cell receptor beta (TCRβ)鎖とCD8α鎖の遺伝子のクローニングを行った。その結果、他の脊椎動物と高い相同性を持つギンブナTCRβとCD8αの同定に成功した。これらの遺伝子はT細胞が存在すると予想される臓器(胸腺、腎臓、脾臓、末梢血)で強く発現すること、また、同種異系(allogeneic)の鱗を移植したギンブナで強く発現することが明らかとなった。以上の結果はこれらの遺伝子がギンブナのCTLマーカーとして有用であることを示している。(2)次にウイルス感染細胞に対する特異的細胞傷害活性の担当細胞が哺乳類のCTLに相同するものかを調べるため、ギンブナ白血球を4つの細胞群に分け、ウイルス特異的細胞傷害活性及びT細胞関連レセプターの発現量との関係を調べた。その結果、CD8α及びTCRβを強く発現しているsIg陰性リンパ球が含まれる細胞群のみがウイルス特異的傷害活性を有することが明らかなった。以上の結果から、魚類でも哺乳類と同様にウイルス抗原特異的細胞傷害活性を有するエフェクター細胞は、sIg陰性のリンパ球で、TCRβ、CD8αを発現していることが示唆された。

我们通过使用 S3n 克隆和 S3n 衍生细胞系，成功诱导了针对病毒感染细胞的抗原特异性细胞毒活性（CTL 样活性）。在本研究中，为了阐明具有抗原特异性细胞毒活性的效应细胞的特征，我们进行了（1）Gimbuna T细胞标记物的鉴定，以及（2）病毒特异性CTL样活性和T细胞标记物的表达水平我们研究了之间的相关性。 (1)首先，我们克隆了T细胞受体β(TCRβ)链和CD8α链基因，它们被认为是CTL的重要表面标志物。结果，我们成功鉴定了中华柞树的TCRβ和CD8α，它们与其他脊椎动物具有较高的同源性。很明显，这些基因在T细胞预计存在的器官（胸腺、肾脏、脾脏、外周血）以及移植有异体鳞片的蠹鱼中强烈表达。上述结果表明这些基因可用作长颈鹿的CTL标记。 (2)接下来，为了研究对病毒感染细胞具有特异性细胞毒活性的细胞是否与哺乳动物CTL同源，我们将Gimbuna白细胞分为四个细胞组，研究其与受体表达水平的关系。结果显示，只有含有强表达CD8α和TCRβ的sIg阴性淋巴细胞的细胞群才具有病毒特异性破坏活性。上述结果表明，在鱼类中，与在哺乳动物中一样，具有病毒抗原特异性细胞毒活性的效应细胞是表达TCRβ和CD8α的sIg阴性淋巴细胞。