漢方薬のアルツハイマー病に関する治療メカニズムの解析

中草药治疗阿尔茨海默病的作用机制分析

• 批准号: 03F00322
• 负责人: 木内 一壽
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00322/
• 关键词: アルツハイマー病; 漢方薬; 低酸素培養システム; サイトカイン; アストログリア細胞; 脳毛細血管内皮細胞; アミロイドβタンパク質; neprilysin

本研究は、血管障害性アルツハイマー病に対する漢方薬の効果を評価するため、独自の低酸素培養システムを用いて、脳血液関門に係わるアストログリア細胞と脳血管内皮細胞、および、中枢神経系での免疫系を担当するミクログリア細胞における遺伝子発現の解析を行うことを目的としている。本年度は、アストログリア細胞の培養細胞株の一つであるC6グリオーマ細胞に対するIL-1β、IFNγなどのサイトカイン、および、ミクログリア細胞の遊走化因子であるATPに関し、低酸素条件下でのVEGF、GDNF、COX-2、iNOSなどの遺伝子の発現誘導に及ぼす影響についてRT-PCR法を用いて解析した。C6グリオーマ細胞では、低酸素条件下(1%酸素で4時間培養)で、VEGFおよびCOX-2遺伝子について約2倍の発現誘導が見られたが、GDNF遺伝子は発現が抑制された。iNOS遺伝子は発現量が低く有意差は認められなかった。アルツハイマー病の悪化にともない脳組織内濃度が上昇するIL-1βの作用については、GDNFおよびCOX-2遺伝子の発現誘導が増加し、同時に低酸素状態で培養すると、COX-2遺伝子ではさらに促進されるが、GDNF遺伝子では抑制された。一方、炎症ストレスにより上昇するIFNγの作用に関しては、COX-2およびGDNF遺伝子に対しIL-1βと同様の傾向が見られた。また、VEGF遺伝子については、対照群(正常酵素分圧)で発現量が増加するものの、同時に低酸素状態で培養しても発現量には差異がなく、IFNγとの相乗効果は見られなかった。ATPについてはCOX-2遺伝子のみに発現量の上昇が見られた。以上の結果から、アストログリア細胞では、IL-1βやIFNγなどのサイトカイン刺激と低酸素状態との相乗効果により誘導されるCOX-2遺伝子が、漢方薬治療の対象として最有力候補であると考えられる。現在、アミロイドβタンパク質の分解に係わるneprilysin遺伝子の解析、および、脳毛血管内皮細胞の正常細胞培養系の確立を進めている。

在这项研究中，为了评估中草药对阿尔茨海默氏病血管疾病的影响，免疫入口和脑血管内皮细胞与大脑血屏障相关，目的是使用其自身的低氧培养系统。系统。今年的VEGF和GDNF，GDNF在低氧条件下，用于C6 Grioma细胞的IL-1β，IFNγ细胞和ATP，是小胶质细胞的，这是Astroglia细胞的培养细胞之一。使用RT-PCR方法分析了基因表达（例如Cox-2和Inos）的表达。在低氧条件下（1％氧的4小时培养）中，在C6格里马瘤细胞中，诱导VEGF和COX-2基因的两倍，但GDNF基因被抑制。 iNOS基因表达低，没有显着差异。关于随着阿尔茨海默氏病的恶化，IL-1β的影响增加了脑组织的浓度，GDNF和COX-2基因的表达增加，同时在缺氧中培养，Cox-2基因是然而，进一步促进了它被GDNF基因抑制。另一方面，由于COX-2和GDNF基因，IFNγ的影响与IL-1β相同。另外，尽管控制组的VEGF基因的表达量增加（正常的酶电压），但即使在低氧状态下培养的表达也没有差异，并且与IFNγ没有协同作用。至于ATP，仅增加COX-2基因。基于上述结果，与星形胶质细胞一样，由细胞因子刺激（例如IL-1β和IFNγ和缺氧状态）的协同作用诱导的COX-2基因被认为是中国草药治疗的最佳候选者。目前，促进了与淀粉样蛋白β蛋白分解相关的Neprilysin基因的分析，并建立了大脑hair的管细胞细胞的正常细胞培养系统。