海洋生物由来ハロゲン化テルペン類の分析と生合成メカニズムの解明

海洋生物卤化萜烯的分析及生物合成机制的阐明

基本信息

批准号：
03F00300
负责人：
伊藤伸哉
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Toyama Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

海藻ホソユカリ(Plocamium species)に見出した新規ハロペルオキシダーゼの完全精製を行うことを目的に研究を行った。特に、海藻ホソユカリは日本沿岸部では群生しておらず、精製に十分な藻体が得られないことと、多様な形態を示すことから、富山湾で採集できる数種のホソユカリ並びに類縁種におけるハロペルオキシダーゼの活性測定を行った。同酵素活性は3-methyl-2-buten-1-o1の2-bromo-3-methyl-1,3-dihydroxybutaneの変換をガスクロマトグラフィー(GC)にて測定する。測定に先立ち、標準化合物である2-bromo-3-methyl-1,3-dihydroxybutaneを化学合成し、シリカゲルにて精製し、GC-MSにて構造を確認した。この標準品を使用して測定のための検量線を作成し、分析を行った。活性を有する海藻を確認し、このデータを基に、高知県海洋深層水研究所に海藻の大量培養を依頼した。しかし、同海藻は生育が遅く、他の海藻や単藻類の繁殖のため単藻化には至っていない。現在、新しい藻体を使用して再度培養を試みている。今後、海藻は主に直接採集して使用する予定である。他方、フジマツモ(Rhodomela larix(Turner)C.Agardh)、イトフジマツモ(Rhodomela subfusca(Woodward)C.Agardh)はともに、臭化フェノール類を多量に蓄積することが知られているにもかかわらず、その機構は未だに不明である。そこで、両者について基質特異的なハロペルオキシダーゼが存在するか否かについて、9種の化合物(L-tyrosine,phenylalanine,O-hydroxybenzyl alcohol,L-DOPA,phloroglycinol,anisole,phenol,shikimik acid,phenylpyruvic acid)について精査した。しかし、一部酸化産物が検出された以外は、臭素化物は認められなかった。現在、さらに反応条件、各種化合物を検討中である。

该研究的目的是完全纯化在海藻霍索亚（Hosoyukari）（plocamium sypt）中发现的新型卤代氧化酶。特别是，在日本的沿海地区没有种植海藻霍索亚（Hosoyukari），并且没有产生足够的藻类以进行纯化，并且它表现出多种形态，并且它在几种霍索伊卡里（Hosoyukari）和相关物种中的活性在Toyama湾收集。通过3-甲基-2-丁烷-1-O1的2-溴-3-甲基-1,3-二羟基丁烷通过气相色谱（GC）测量酶活性。在测量之前，对标准化合物2-Bromo-3-甲基-1,3-二羟基丁烷进行化学合成，在硅胶上纯化，并通过GC-MS确认结构。该标准用于准备校准曲线进行测量和分析。积极的海藻得到了确认，根据这些数据，我们要求高知县深海水研究所培养大量海藻。但是，由于其他海藻和单藻的繁殖，海藻生长缓慢，尚未转化为单藻。目前，正在尝试再次尝试培养新藻类。将来，海藻将主要收集和直接使用。另一方面，已知富士（Rhodomela larix（Turner）C。agardh）和Rhodomela subfusca（Woodward）C。Agardh）均已积累大量的溴化苯酚，但其机制仍然未知。因此，检查了九种化合物（L-酪氨酸，苯丙氨酸，O-羟基苯甲酸醇，L-DOPA，磷酸糖醇，苯二醇，苯酚，苯酚，Shikimik酸和苯基烷酸），以确定是否存在基质特异性卤素氧化酚酶。但是，除了检测到部分氧化产物外，未观察到溴化。目前，正在研究进一步的反应条件和各种化合物。