海洋生物由来ハロゲン化テルペン類の分析と生合成メカニズムの解明

海洋生物卤化萜烯的分析及生物合成机制的阐明

基本信息

批准号：
03F00300
负责人：
伊藤伸哉
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Toyama Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

海藻ホソユカリ(Plocamium species)に見出した新規ハロペルオキシダーゼの完全精製を行うことを目的に研究を行った。特に、海藻ホソユカリは日本沿岸部では群生しておらず、精製に十分な藻体が得られないことと、多様な形態を示すことから、富山湾で採集できる数種のホソユカリ並びに類縁種におけるハロペルオキシダーゼの活性測定を行った。同酵素活性は3-methyl-2-buten-1-o1の2-bromo-3-methyl-1,3-dihydroxybutaneの変換をガスクロマトグラフィー(GC)にて測定する。測定に先立ち、標準化合物である2-bromo-3-methyl-1,3-dihydroxybutaneを化学合成し、シリカゲルにて精製し、GC-MSにて構造を確認した。この標準品を使用して測定のための検量線を作成し、分析を行った。活性を有する海藻を確認し、このデータを基に、高知県海洋深層水研究所に海藻の大量培養を依頼した。しかし、同海藻は生育が遅く、他の海藻や単藻類の繁殖のため単藻化には至っていない。現在、新しい藻体を使用して再度培養を試みている。今後、海藻は主に直接採集して使用する予定である。他方、フジマツモ(Rhodomela larix(Turner)C.Agardh)、イトフジマツモ(Rhodomela subfusca(Woodward)C.Agardh)はともに、臭化フェノール類を多量に蓄積することが知られているにもかかわらず、その機構は未だに不明である。そこで、両者について基質特異的なハロペルオキシダーゼが存在するか否かについて、9種の化合物(L-tyrosine,phenylalanine,O-hydroxybenzyl alcohol,L-DOPA,phloroglycinol,anisole,phenol,shikimik acid,phenylpyruvic acid)について精査した。しかし、一部酸化産物が検出された以外は、臭素化物は認められなかった。現在、さらに反応条件、各種化合物を検討中である。

我们进行研究的目的是完全纯化在海藻 Plocamium 物种中发现的新型卤过氧化物酶。特别是，海藻 Hosoyukari 并不生长在日本沿海的群体中，因此很难获得足够的藻类进行纯化，并且测量了其表现出多种形态的过氧化物酶活性。使用气相色谱 (GC) 将 3-甲基-2-丁烯-1-o1 转化为 2-溴-3-甲基-1,3-二羟基丁烷来测量酶活性。测量之前，化学合成标准化合物2-溴-3-甲基-1,3-二羟基丁烷，使用硅胶纯化，并使用GC-MS确认其结构。使用该标准品制作测定用校准曲线并进行分析。他们发现了活性海藻，并根据该数据要求高知县深海水研究所大规模培养海藻。但这种海藻生长缓慢，由于其他海藻和单藻的繁殖，尚未成为单藻。我们目前正在尝试使用新的藻类再次培育藻类。今后，海藻将主要集中采集并直接利用。另一方面，尽管众所周知，Rhodomela larix (Turner) C. Agardh 和 Rhodomela subfusca (Woodward) C. Agardh 都会积累大量的溴化酚，但它们的作用机制仍不清楚。因此，我们研究了两者是否存在底物特异性卤过氧化物酶。我们已经检查了细节。然而，除了检测到一些氧化产物外，没有观察到溴化物。我们目前正在研究进一步的反应条件和各种化合物。