プロスタノイドによる血管平滑筋NADPHオキシダーゼの活性化機構の解明

阐明前列腺素类药物激活血管平滑肌 NADPH 氧化酶的机制

基本信息

批准号：
14770036
负责人：
勝山真人
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

NADPHオキシダーゼは血管組織における主要な活性酸素産生酵素である。申請者らはプロスタグランジン(PG)F_<2α>による血管平滑筋細胞の肥大には、NADPHオキシダーゼの触媒サブユニットのひとつであるNOX1の発現誘導とそれによって産生される活性酸素が必須であることを見出した。さらに転写因子ATF-1がPGF_<2α>、PDGF、FBS、ホルボールエステルによるNOX1の発現誘導に必須であることを明らかにした。アンギオテンシンIIによる血管平滑筋細胞の肥大にEGF受容体のトランスアクティベーションが関与することから、NOX1の発現誘導へのEGF受容体の関与を検討した。PGF_<2α>とPDGFはEGF受容体のリン酸化を引き起こした。すなわちPGF_<2α>とPDGFはEGF受容体のトランスアクティベーションを引き起こした。またEGF受容体のチロシンキナーゼ活性を阻害するTyrphostin AG1478は、PGF_<2α>によるNOX1の発現誘導を抑制した。PGF_<2α>はERK1/2のリン酸化を引き起こした。このリン酸化はTyrphostin AG1478により抑制された。またMEK-ERK系の阻害剤PD98059はPGF_<2α>によるNOX1の発現誘導を抑制した。PGF_<2α>はPI3キナーゼの基質であるAktのリン酸化を引き起こした。このリン酸化はTyrphostin AG1478により抑制された。またPI3キナーゼ阻害剤はPGF_<2α>によるATF-1のリン酸化とNOX1の発現誘導を抑制した。以上のことからNOX1の発現誘導には、EGF受容体のトランスアクティベーションとそれに引き続いて起こるMEK-ERK系とPI3キナーゼ-ATF-1系の活性化が関与することが明らかになった。

NADPH氧化酶是血管组织中主要的活性氧产生酶。申请人发现NOX1(NADPH氧化酶的催化亚基之一)的表达的诱导以及由此产生的活性氧对于前列腺素(PG)F_ 2α 诱导的血管平滑肌细胞的肥大是必需的。。此外，我们发现转录因子ATF-1对于PGF_2α、PDGF、FBS和佛波酯诱导NOX1表达是必需的。由于EGF受体反式激活参与血管紧张素II诱导的血管平滑肌细胞肥大，因此我们研究了EGF受体在诱导NOX1表达中的作用。 PGF_2α和PDGF引起EGF受体的磷酸化。即，PGF_2α和PDGF引起EGF受体的反式激活。此外，抑制EGF受体的酪氨酸激酶活性的酪氨酸磷酸化抑制剂AG1478抑制PGF_2α对NOX1表达的诱导。 PGF_<2α>引起ERK1/2的磷酸化。这种磷酸化被 Tyrphostin AG1478 抑制。此外，MEK-ERK系统抑制剂PD98059抑制PGF_2α对NOX1表达的诱导。 PGF_2α引起Akt（PI3激酶的底物）的磷酸化。这种磷酸化被 Tyrphostin AG1478 抑制。此外，PI3激酶抑制剂抑制ATF-1的磷酸化和PGF_<2α>诱导的NOX1表达的诱导。上述结果表明NOX1表达的诱导涉及EGF受体的反式激活以及随后MEK-ERK系统和PI3激酶-ATF-1系统的激活。