節足動物により媒介される植物ウイルスの伝搬機構の解析

节肢动物介导的植物病毒传播机制分析

• 批准号: 14760028
• 负责人: 近藤 秀樹
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760028/
• 关键词: 植物; ラブドウイルス; 伝搬機構; ダニ

本研究は植物病原体であるウイルスと媒介者との相互作用を明らかにすることにより、ウイルス伝搬機構を理解することが目的である。最終年度は、ランえそ斑紋ウイルス(OFV)の遺伝子解析に加え、媒介者であるオンシツヒメハダニ側にも焦点をあて解析した。1.ウイルス構造蛋白質を調べたところ、49KはRNA結合能を持ち、26Kは核移行性を示した。さらに20Kは粒子形成に関わると考えられた。非構造タンパク質の38Kは細胞間移行タンパク質の可能性が示唆された。61K蛋白質はシーケンス解析から、ラブドウイルスのG蛋白質に類似性を示し、N末端にシグナル様配列、C末端には膜貫通ドメイン様配列を持つ推定膜蛋白質であった。61Kは成熟ウイルス粒子表面に提示されるスパイク蛋白質と推定されたが、OFVの成熟粒子は非常に少なく、その粒子からの検出は困難であった。一方、植物個体上で継代したウイルス株は、61Kに1塩基欠失や塩基置換が認められる場合もあり、この遺伝子は伝搬性に関与するウイルス因子である可能性が考えられる。2.媒介者であるオンシツヒメハダニの分類学的位置づけを行うため、ミトコンドリアcytochrome oxidase subunit I(MIT-CO1)の保存領域をクローニングし、その塩基配列解析を行った。さらに、ヒメハダニの組織・細胞内所見を電子顕微鏡レベルで観察したが、ダニ体内でのウイルスの分布様式等の詳細を解明するには至らなかった。ウイルス非伝搬ダニ系統の作出を目指し、媒介者であるヒメハダニに対して一定期間高温処理を施した結果、ウイルス伝搬能を喪失したと考えられるダニ系統が得られた。現在、その詳細を解析中である。今後、本研究を発展させるためには、ウイルスの感染性クローンや人工ミニゲノムの作製が急務であり、ウイルス遺伝子(とくに61K)とハダニとの相互作用について解析を進めていく必要がある。

这项研究的目的是通过阐明植物病毒病毒与介体之间的相互作用来了解病毒传播的机制。在最后一年，除了对兰花斑块病毒的遗传分析（OFV）外，我们还专注于介体，即shitsusuki蜘蛛螨。 1。检查病毒结构蛋白时，49K显示了RNA结合能力，26K显示核易位。此外，被认为参与粒子形成的20K。有人提出38K非结构蛋白可能是细胞对细胞易位蛋白。序列分析表明，61K蛋白类似于色齿病毒的G蛋白，并且是一种假定的膜蛋白，在N末端具有信号样序列，在C-末端是跨膜域样序列。尽管据估计61K是在成熟病毒颗粒表面呈现的尖峰蛋白，但很少有成熟的颗粒，从而使这些颗粒的检测困难。另一方面，传递植物个体的病毒菌株可能在61K处表现出单碱基缺失或碱基取代，并且该基因可能是参与传播的病毒因子。 2。要分类位置介体（onshitsusuki蜘蛛螨），将线粒体细胞色素氧化酶亚基I（MIT-CO1）的保守区域（MIT-CO1）克隆起来，并分析了碱基序列。此外，尽管在电子显微镜水平上观察到蜘蛛螨的组织和细胞内发现，但我们无法阐明螨虫中病毒分布的细节。产生非病毒式螨虫的目的，以及由于对介体的高温治疗，蜘蛛螨的高温治疗，导致螨虫被认为失去了传播病毒的能力。目前正在分析细节。为了在将来开发这项研究，迫切需要创建病毒和人造小型词的传染性克隆，并且有必要对病毒基因（尤其是61K）和蜘蛛螨之间的相互作用进行分析。

项目成果

N A reovirus of the fungus Cryphonectria parasitica that is infectious as particles and related to the Coltivirus genus of animal pathogens

N 真菌 Cryphonectria parasitica 的呼肠孤病毒，具有颗粒传染性，与动物病原体的 Coltivirus 属相关

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Virology 78
• 作者: Hillman;B.I.;Supyani;Kondo;H.;Suzuki;N.
• 通讯作者: N.

Hillman, B.I., Supyani, Kondo, H., Suzuki, N.: "N A reovirus of the fungus Cryphonectria parasitica that is infectious as particles and related to the Coltivirus genus of animal pathogens"Journal of Virology. 78. 892-898 (2004)

Hillman, B.I.、Supyani、Kondo, H.、Suzuki, N.：“N 一种真菌 Cryphonectria parasitica 呼肠孤病毒，其颗粒具有传染性，与动物病原体的 Coltivirus 属相关”《病毒学杂志》。

Tamada, T., Miyanishi, M., Chiba, S., Kondo, H., Han, C.G.: "Pathogenicity and molecular variability of Beet necrotic yellow vein virus isolates from Europe, Japan, China and the United States."Proc. Symp. 5th Int. Working Group on Plant Viruses with Fung

Tamada, T.、Miyanishi, M.、Chiba, S.、Kondo, H.、Han, C.G.：“来自欧洲、日本、中国和美国的甜菜坏死黄脉病毒分离株的致病性和分子变异性。”Proc。

Kondo, H., Maeda, T., Tamada, T.: "Nucleotide sequences of the gene junctions of bipartite genome of Orchid fleck virus"12th International Congress of Virology(講演要旨). 440 (2002)

Kondo, H.、Maeda, T.、Tamada, T.：“兰花斑点病毒二分基因组基因连接的核苷酸序列”第 12 届国际病毒学大会（演讲摘要）440（2002 年）。