水環境におけるヒト感染タイプのクリプトスポリジウムの分布に関する研究

水环境中感染人类的​​隐孢子虫分布研究

• 批准号: 14750464
• 负责人: 橋本 温
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Anan National College of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14750464/
• 关键词: Cryptosporidium; Nested-PCR; 遺伝子型; 宿主特異性; 水道水源; 下水; クリプトスポリジウム; Genotype; 水源水域; PCR; PCR-RFLP

下水および河川水から顕微鏡下で単離したクリプトスポリジウムオーシストの遺伝子型をPCRおよびダイレクトシーケンシングによって特定する手法を確立した。本法は18S r RNA領域の多型部位を標的として,Cryptosporidium属の種や遺伝子型を識別でき,宿主特異性の差異を把握することができることから,水道原水や下水などのCryptosporidiumの検査に適用することで,従来法では把握できなかった汚染源や人への感染性など,公衆衛生上極めて重要な情報を得ることができる。実際に本法を下水および河川水の調査に適用したところ,下水では6ヶ月間の74個のオーシストについて解析を行い,その51%が人を固有の宿主とするCryptosporidium parvum genotype 1であることが明らかになった。その他,人獣共通感染型であるC.parvum genotype 2およびC.meleagridisも検出された。このことから,本地域(都内の人口集中地)では人のCryptosporidium症はC.parvum genotype 1によるものが主流であり,下水が再び水源や水域の汚染源となりうる可能性が示唆された。河川水の調査でも同様に人を固有のタイプとするC.parvum genotype 1が単離した18個のうちの72%をしめ,未処理の家庭排水等,人に起因する排水による汚染が強く示唆された。

我们建立了一种通过 PCR 和直接测序在显微镜下鉴定从污水和河水中分离的隐孢子虫卵囊基因型的方法。该方法针对18S r RNA区域的多态性位点，可以鉴定隐孢子虫种类和基因型，并了解宿主特异性的差异，因此可以应用于原水、污水等中隐孢子虫的检测。可以获得对公共卫生极其重要的信息，例如污染源及其对人类的感染性，而这些信息是无法使用常规方法确定的。当该方法实际应用于污水和河水调查时，对6个月内污水中的74个卵囊进行了分析，发现其中51%是隐孢子虫基因型1，其唯一宿主是人类。清除。此外，还检测到人畜共患型 C. parvum 基因型 2 和 C. meleagridis。这些结果表明，该地区（东京人口密集区）的人类隐孢子虫病主要是由基因1型隐孢子虫引起的，污水可能再次成为水源和水体的污染源。同样，在对河水的调查中，人类特有的 C.parvum 基因型 1 占 18 个分离样本的 72%，强烈表明受到人类引起的废水（例如未经处理的生活废水）的污染。

项目成果

橋本, 杉本, 森田, 平田: "河川から単離したクリプトスポリジウムオーシストの遺伝子解析"土木学会第58回年次講演会講演概要集. (発表予定).

Hashimoto、Sugimoto、Morita、Hirata：“从河流中分离出的隐孢子虫卵囊的遗传分析”日本土木工程师学会第 58 届年会摘要（待提交）。

Hashimoto, et al.: "Molecular Characterization of a Single Cryptosporidium Oocyst in Sewage by Semi-Nested PCR"IWA, World Water Congress,. (Accepted). (2004)

Hashimoto 等人：“通过半巢式 PCR 对污水中单个隐孢子虫卵囊进行分子表征”IWA，世界水大会。