重金属及び内分泌撹乱物質の骨代謝に及ぼす作用:骨硬化ホルモンとのクロストーク

重金属和内分泌干扰物对骨代谢的影响：与骨硬化激素的相互作用

基本信息

批准号：
14740455
负责人：
鈴木信雄
金额：
$ 2.56万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

初年度は、キンギョのウロコを用いて、カドミウム(Cd)とビスフェノールA(BPA)の骨に対する作用を調べるためのin vitroの培養系を確立した。この系により、破骨細胞は高感度(10^<-13>M)で反応し、Cdに対して抑制作用を示した。骨芽細胞は短時間の培養では影響がみられなかったが、64及び96時間培養ではその活性が低下した。BPAもCdと同様に、破骨及び骨芽細胞の活性を抑制することが判明した。次年度は、in vitroの作用がin vivoでも再現できるかを確認し、さらにBPAにおいて、血液中のカルシウム(Ca)濃度と共に骨硬化ホルモンであるカルシトニン(CT)レベルも低下することを証明した。最終年度(平成16年度)は、酢酸トリブチルスズ(TBTA)とメチル水銀(MeHg)について骨代謝に及ぼす作用を調べ、CT受容体の発現に及ぼす影響も解析した。【研究成果】1 TBTA処理(in vitro)により破骨細胞の活性は変化しなかったが、骨芽細胞の活性が低下した。その作用は6時間後に影響が見られ、64時間以降でしか影響が見られなかったCdやMeHgよりも強いことが判明した。2 TBTA(10^<-8>、10^<-10>M)及びMeHg(10^<-7>M)を飼育水に入れ、キンギョに対する影響を調べると、血中Ca及びCT濃度が上昇した。この作用はTBTAの方が強く、10^<-10>Mでも影響がみられた。3 キンギョのウロコからCT受容体cDNAの部分配列を決定し、MeHg処理(in vitro)による影響を調べた。その結果、受容体の発現は低下し、重金属処理によりホルモンの感受性も変化することが判明した。以上のことから、重金属と内分泌撹乱物質の骨代謝に及ぼす影響をウロコの培養系で調べ、骨硬化ホルモンであるCTの分泌やその受容体の発現に及ぼす影響を解析することによりクロストークの一端を明らかにした。

第一年，我们利用金鱼鳞片建立了体外培养系统，研究镉（Cd）和双酚A（BPA）对骨骼的影响。利用该系统，破骨细胞以高灵敏度(10^-13M)响应并显示出对Cd的抑制作用。成骨细胞不受短期培养的影响，但培养64和96小时后其活性下降。与镉类似，BPA 也被发现能抑制破骨细胞和成骨细胞的活性。第二年，我们确认了体外效果是否可以在体内重现，并进一步证明BPA可以降低血液中的钙（Ca）浓度以及骨硬化激素降钙素（CT）水平。在最后一年（2004年），我们研究了醋酸三丁基锡（TBTA）和甲基汞（MeHg）对骨代谢的影响，还分析了它们对CT受体表达的影响。 [研究结果] 1 TBTA处理（体外）没有改变破骨细胞的活性，但降低了成骨细胞的活性。 6小时后即可看到效果，并且发现比Cd和MeHg的效果更强，后者仅在64小时后才显示效果。 2 当在饲养水中添加TBTA（10^<-8>、10^<-10>M）和MeHg（10^<-7>M）并研究它们对金鱼的影响时，血Ca和CT浓度增加。做过。 TBTA 的这种效果更强，甚至在 10^-10M 时也可见。 3.我们测定了金鱼鳞片CT受体cDNA的部分序列，并研究了甲基汞处理（体外）的效果。结果表明，重金属处理降低了受体表达，并且还改变了激素敏感性。基于此，我们在规模化培养体系中研究了重金属和内分泌干扰物对骨代谢的影响，并分析了它们对骨硬化激素CT分泌及其受体表达的影响，从而初步了解重金属和内分泌干扰物对骨代谢的影响。串扰显露出来。