マイクロアレイを用いた植物ホルモンオーキシンの作用機構の解明

利用微阵列阐明植物激素生长素的作用机制

基本信息

批准号：
14740442
负责人：
澤進一郎
金额：
$ 2.56万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

植物ホルモンオーキシンの作用機構の一つとして維管束細胞の分化調節があげられる。本年度はシロイヌナズナを材料に、2つのアプローチを用いた維管束分化に関する遺伝子の単離、解析を行った。1;約5万ラインのジーントラップラインから維管束特異的にレポーター活性が観察される90ラインを選抜し、維管束を含む形態系に以上を示す4ライン、及び、前形成層においてレポーター活性が観察される3ラインを選抜し、詳細な発現解析を行い、これらの原因遺伝子をも単離した。2;道管成熟段階でのみ発現が観察されるXyl::YFP形質転換体を突然変異源処理し、11の突然変異体を単離した。これらは、非維管束細胞においても異所的なレポーター活性が観察された。11突然変異体は4つの遺伝子座にマップされ、現在原因遺伝子の単離を目指している。これらの突然変異体では、異所的にリグニンの蓄積が観察されさらに、RT-PCRの結果、道管分化に関わるAGPやXCP1遺伝子発現が突然変異体において上昇していた。さらに、道管成熟課程の後期に当たるマーカーであるp56::YFPを持つ突然変異体でも異所的な発現が観察され、これらの突然変異体では、非維管束細胞が道管細胞へと異所的に、部分的に再分化していることが示唆された。一方、維管束パターンや、前形成層のマーカー発現は正常であったために、この突然変異体は維管束の成熟段階のみに異常をきたしていることが明らかになった。

植物激素生长素的作用机理之一是调节血管束细胞的分化。今年，我们使用拟南芥作为使用两种方法分离和分析与血管束分化相关的基因的材料。 1; 90行在血管束中特异性观察到了大约50,000行中的记者活性，并且选择了在包含血管束的形态学系统中观察到报告基因活性的四条线，并且选择了在前级联层中观察到的记者活性的三条线，选择了详细的表达分析，并进行了详细的表达分析，并进行了隔离基因，并且是分立的。 2; Xyl :: YFP转化体，其表达仅在导管成熟阶段观察到，并分离出11个突变体。这些细胞还表现出异位报告基因活性。这11个突变体被映射到四个基因座，目前旨在隔离因果基因。在这些突变体中，观察到木质素的积累，RT-PCR显示突变体中涉及导管分化的AGP和XCP1基因表达升高。此外，在携带p56 :: YFP的突变体中也观察到了异位表达，这是一种在导管成熟过程中后期发生的标记，这表明这些突变体中的非对位和部分重新分化为导管细胞中的非血管细胞。另一方面，囊前的血管束模式和标记表达是正常的，并且发现该突变体仅在血管束的成熟阶段是异常的。