固定化複合酵素バイオリアクターによる高機能化光学活性医薬品の開発

利用固定化多酶生物反应器开发高功能光学活性药物

基本信息

批准号：
14780460
负责人：
下田恵
金额：
$ 2.18万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

膜型酵素バイオリアクターを用いた連続的配糖化による光学活性医薬品生産法を確立するため,テルペンおよびフラボノイドを基質として糖加水分解阻害による生産性向上の検討を実施した。1.各種のテルペン(ステロイド)化合物やフラボノイド類の酵素的グルコシル化前年度開発した膜型固定化酵素バイオリアクターを利用して,ニチニチソウ培養細胞由来のUDP-glucosyltransferase活性画分,可溶性画分,膜画分,膜結合型酵素画分,および,顆粒型酵素画分を固定化した後,それぞれの基質特異性を検討した結果,多種類にわたる芳香族化合物やフェノール性物質のグルコシル化を触媒することが確認された。さらに,ステロイドホルモンの一種であるテストステロン還元体の他に,標準反応条件下において,UDP-glucoseを糖供与体として,アンドロステノン還元体の効率的なグルコシル化も触媒し,対応するモノグルコシドを平均変換率40%以上で生成した。また,標準反応条件下において膜画分のUDP-glucosyltransferaseを用いた,植物色素である各種のフラボノイド類への位置選択的なグルコシル化も可能であった。しかし,カテキン,ペラゴニジン,コウジ酸,および,ポリフェノール等については,今回,設定した酵素反応条件下においては優位にグルコシル化されなかった。2.グルコシダーゼ活性の制御による生産性の向上膜型固定化酵素バイオリアクターによって生産されたモノグルコシドが,ニチニチソウ培養細胞由来の膜画分や可溶性画分に共存するbeta-グルコシダーゼにより加水分解されることが確認されたことから,モノグルコシドの反応混合液中での分解を防止することを目的として,beta-グルコシダーゼの基質であるイノシトールを添加して反応させることにより,添加しない場合に比べて約1.5倍増加させることが可能であった。

为了建立一种通过使用膜酶生物反应器连续糖化产生光学活性药物的方法，我们通过使用萜烯和类黄酮作为底物抑制糖酵解来提高生产力。 1。使用膜型固定酶生物反应器的各种萜烯（类固醇）化合物和类黄酮的酶基化，我们将UDP灰葡萄糖基转移酶的活性分数固定在上一年，从Nichininisiago细胞。结果，研究了每种的底物特异性，并证实它催化了多种芳香族化合物和酚类物质的葡萄糖基化。此外，除了减少睾丸激素的形式外，在标准反应条件下，udp-葡萄糖作为糖供体作为糖供体，雄激素还原形式还被催化以有效地葡萄糖基化雄酮酮降低的形式，以相应的单糖糖苷的平均水平速率产生相应的单糖糖苷，以40％或40％或40％或40％或40％或40％的平均值产生。此外，在使用UDP-灰葡萄糖基转移酶的标准反应条件下，膜分数对各种类黄酮的膜分数也可能是植物色素的。然而，在这种情况下设定的酶促反应条件下，儿茶素，苯胺，曲酸和多酚并未主要是葡萄糖基的。 2。通过控制葡萄糖酶活性提高了生产率，已经证实，由膜 - 毫米纤维化酶生物反应器产生的一型葡萄糖苷被β-葡萄糖苷酶水解水解，β-葡萄糖苷酶在膜和溶质分数中共存，并从nichinis lilyia lilyia lily lily lily lily lily lily，intros instry Intros intros introve introve intross中共存。 β-葡萄糖苷酶是可能的反应，目的是防止反应混合物中的一曲lucosides降解，因此反应是通过添加肌醇（β-葡萄糖苷酶的底物）来进行的，这是反应的结果。