MDSの血球減少の機序に関与するT細胞の解析

MDS血细胞减少机制中涉及的T细胞分析

• 批准号: 13770588
• 负责人: 岩部 弘治
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770588/
• 关键词: 骨髄異形成症候群; 不応性貧血; オリゴクローナルTリンパ球; レパトア解析; T cellレセプターVβ; CDR3領域

本研究は骨髄異形性症候群(MDS)の病体にクローナルなT細胞が関与している可能性について明らかにすることを目的とした。MDS(RA)患者(および正常人)の末梢血・骨髄からリンパ球分画を採取する。このリンパ球からRNAを抽出し、RT-PCR・SSCP法にてT細胞レセプター(TCR)b鎖のCDR3領域のレパトア解析を行う。これにより、ある特定のVb遺伝子を発現しているT細胞の中にクローナルな増殖が強く示唆された場合、そのVb陽性T細胞のCDR3領域の塩基配列、アミノ酸配列を確認し、クローナルなT細胞の存在を確定するとともに、それらのクローナルなT細胞がそのVb陽性T細胞の中のどの位の割合をしめているかを検討した。これにより解析した13例のMDS(RA)患者の末梢血、骨髄にクローナルなT細胞が存在することが明らかにした。同時期に採取した末梢血と骨髄のTCR Vbのレパトアを解析すると、このうちの4症例に骨髄に特異的なT細胞クローンの存在が認められた。このことは、MDSにおいて骨髄をメインの場所とした免疫学的機序の存在を示唆していると考えられた。また、シクロスポリンが有効であった1例においては、投与後に一部のVb subfamilyでクローナルなT細胞の存在を示すバンドの消失が認められた。このことは、本疾患に見られる血球減少に疾患特異的なクローナルなT細胞が関与している可能性を示唆していると考えられた。現在これらのT細胞クローンを単離するとともに、対応抗原の検索を進めている。

本研究的目的是阐明克隆 T 细胞参与骨髓增生异常综合征 (MDS) 病理学的可能性。淋巴细胞部分是从 MDS (RA) 患者（和正常人）的外周血和骨髓中收集的。从这些淋巴细胞中提取 RNA，并使用 RT-PCR/SSCP 方法对 T 细胞受体 (TCR) b 链的 CDR3 区域进行谱分析。如果这强烈表明表达特定Vb基因的T细胞之间存在克隆增殖，那么除了确认Vb的存在之外，我们还确认该Vb阳性T细胞的CDR3区域的核苷酸序列和氨基酸序列，并确认克隆T细胞。 -阳性T细胞，我们还检查了这些克隆T细胞占Vb阳性T细胞的百分比。这表明，在分析的 13 名 MDS (RA) 患者的外周血和骨髓中存在克隆 T 细胞。对同时收集的外周血和骨髓中的 TCR Vb 库进行分析表明，其中 4 例病例中存在骨髓特异性 T 细胞克隆。这被认为表明 MDS 中存在主要位于骨髓的免疫机制。此外，在环孢素有效的一种情况下，表明某些 Vb 亚家族中存在克隆 T 细胞的条带在给药后消失。这似乎表明疾病特异性克隆 T 细胞可能与该疾病中出现的血细胞减少有关。我们目前正在分离这些T细胞克隆并寻找它们相应的抗原。