肺組織のニトロ化における好中球ミエロペルオキシダーゼの役割

中性粒细胞髓过氧化物酶在肺组织硝化中的作用

• 批准号: 13770303
• 负责人: 高橋 裕子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770303/
• 关键词: 一酸化窒素; 肺損傷; 誘導型一酸化窒素合成酵素; ミエロペルオキシダーゼ; ニトロチロシン; クロロチロシン; リポポリサッカライド; 多核白血球; 好中球; 一酸化窒素(Nitvic Oxide); 急性肺障害

従来からリポポリサッカライド(LPS)を気管内に投与することにより惹起される肺の炎症では肺組織のチロシンがニトロ化されることが知られていた。本研究ではラットにLPSを気管内投与した際に生じるチロシンのニトロ化について、LPS投与のみの場合、好中球をなくした場合、NOを吸入させた場合、それぞれの場合に検討し、チロシンのニトロ化がミエロペルオキシダーゼ(MPO)の反応系によるのか、ペルオキシニトライト(PON)の反応系によるのかを明らかにすることを目的とした。誘導型NO合成酵素(iNOS)、ニトロチロシン(MPOとPONとどちらの反応系からも生じる)、クロロチロシン(MPOの反応系のみから生じる)をそれぞれに特異的な抗体をもちいて免疫組織染色し、また、気管支肺胞洗浄液(BALF)中の好中球の数と肺組織のMPO活性を測定した。LPS投与は肺胞壁、肺胞マクロファージ、好中球において、iNOS、ニトロチロシン、クロロチロシンいずれの染色性も亢進させた。サイクロフォスファミドにより白血球数を減少させたり、NO吸入により肺への白血球の集積を抑えても、肺胞マクロファージ内のiNOSの染色性の亢進は抑制されなかった。しかし、肺内にはニトロチロシンもクロロチロシンも産生されていなかった。LPS投与によるチロシンのニトロ化はBALF中の好中球の増加と肺組織中のMPO活性に関連しており、NO吸入はBALF中の好中球数を減らし、チロシンのニトロ化もクロロ化も伴に抑制した。以上より、LPS処理ラットの肺ではMPOの反応系がチロシンのニトロ化に重要であり、炎症の早期のNO吸入は好中球の肺内集積を抑制し、チロシンのニトロ化もクロロ化も減らすことが分かった。

众所周知，肺组织中的酪氨酸在通过将脂多糖（LPS）施加到气管中引起的肺部炎症中被硝化。在这项研究中，在每种情况下仅施用LPS，消除了中性粒细胞，并且没有吸入，在每种情况下都检查了对大鼠的气管内施用LPS时发生的酪氨酸的硝化作用。目的是确定酪氨酸的硝化是由于髓过氧化物酶（MPO）或过氧亚硝酸盐（PON）的反应系统。可诱导的NO合酶（INOS），亚硝基酪氨酸（由MPO和PON反应系统产生）和毒藻素（仅由MPO反应系统产生）被免疫组织化学染色，用每种抗体特异性染色，并在Bronchoalchoalchoalchoalchoalchoalchoalchoalchoalacherals ausvage液体（BALF FISTURED）和MPO活性中均具有中性粒细胞的数量。 LPS给药增强了牙槽壁，肺泡巨噬细胞和中性粒细胞中iNOS，硝基酪氨酸和毒藻素的染色。环磷酰胺减少了白细胞的数量，并通过无吸入抑制了肺部白细胞的积累，但肺泡巨噬细胞中iNOS的染色增加并未抑制。但是，肺中均未产生硝基酪氨酸和氯酸酪氨酸。通过LPS给药对酪氨酸的硝化与肺组织中嗜中性粒细胞的增加有关，没有吸入减少BALF中嗜中性粒细胞的数量，并抑制酪氨酸硝化和氯仿。从上面可以发现，MPO反应系统对于LPS处理大鼠的肺中的酪氨酸硝化很重要，并且在炎症的早期阶段没有吸入抑制中性粒细胞的积累并减少酪氨酸硝基化和氯仿。

项目成果

Hataishi, R., Kobayashi, H., Takahashi, Y., 他: "Myeloperoxidase-associated Tyrosine nitration after intratracheal administration of lipopolysaccharide in rats"Anesthesiology. 97. 887-895 (2002)

Hataishi, R.、Kobayashi, H.、Takahashi, Y. 等人：“大鼠气管内施用脂多糖后与髓过氧化物酶相关的酪氨酸硝化”麻醉学 97. 887-895 (2002)。