ボルナ病ウイルスの核輸送機構の解明

博尔纳病病毒核转运机制的阐明

基本信息

批准号：
13770150
负责人：
小林剛
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770150/
关键词：
ボルナ病ウイルス持続感染輸送機構核輸送

项目摘要

ボルナ病ウイルス(BDV)は他の動物モノネガウイルスの中で唯一、感染細胞の核内で複製する。本研究では、BDVの複製機構を解明するため、BDV主要抗原の核内外輸送機構について解析を行った。(平成14年度研究実績)BDV PおよびX蛋白質の細胞内局在調節機構の解明BDV P蛋白質は核移行シグナル(NLS)を保持することから、単独では核に局在する。しかし、BDV持続感染細胞内ではP蛋白質は細胞質にもその局在が認められる。P蛋白質はウイルス複製、病原性に重要な因子であることから、P蛋白質の細胞内局在調節機構について詳細な解析を行った。その結果、P蛋白質はX蛋白質の存在下では細胞質に局在した。PおよびX蛋白質は同一のmRNAから合成される。そこで、PおよびX蛋白質の発現量比について検討した結果、PおよびX蛋白質の発現量比は感染細胞内で調節されていることが明らかとなった。以上の結果より、BDVは複製に必須のウイルス蛋白質の発現量を変化させることで、細胞内局在を調節し、ウイルス複製を行っていることが示唆された(投稿中)。BDV P蛋白質の核外輸送活性の解明P蛋白質領域内にはメチオニン残基に富む領域が存在している。P蛋白質はX蛋白質の存在下では細胞質に局在する。しかし、この領域のアミノ酸欠損および置換変異体ではPおよびX蛋白質は核内に蓄積した。そこで、より詳細に解析を行った結果、P蛋白質のメチオニン残基に富む領域は核外輸送シグナル(NES)として機能していることが明らかとなった。以上の結果より、P蛋白質はNLSおよびNESを保持し、BDVの核内外の輸送に深く関与している可能性が示唆された。また、X蛋白質はP蛋白質との結合により、P蛋白質のNLS機能を阻害する。このため、BDV蛋白質の細胞内局在は蛋白質間相互作用により調節されている可能性も示唆された(投稿準備中)。

博尔纳病病毒（BDV）是唯一一种在受感染细胞核内复制的动物单负病毒。本研究为了阐明BDV的复制机制，我们对BDV主要抗原的核输出机制进行了分析。（2002年研究成果）阐明BDV P和BDV的亚细胞定位调控机制然而，在持续感染 BDV 的细胞中，P 蛋白也定位于细胞质中。由于P蛋白是病毒复制和致病性的重要因素，我们对P蛋白的细胞内定位调控机制进行了详细分析。结果，在 X 蛋白存在的情况下，P 蛋白定位于细胞质中。 P 和 X 蛋白由相同的 mRNA 合成。因此，通过研究P蛋白和X蛋白的表达量比，可知P蛋白和X蛋白的表达量比在感染细胞内受到调节。上述结果表明，BDV 通过改变复制必需的病毒蛋白的表达水平来调节其细胞内定位和复制（目前已提交）。 BDV P 蛋白的核输出活性的阐明 P 蛋白区域内有一个富含蛋氨酸残基的区域。当 X 蛋白存在时，P 蛋白定位于细胞质。然而，在该区域的氨基酸缺失和取代突变体中，P和X蛋白在细胞核中积累。更详细的分析表明，P 蛋白富含蛋氨酸残基的区域充当核输出信号 (NES)。这些结果表明P蛋白保留了NLS和NES，并且可能深入参与BDV进出细胞核的转运。此外，X蛋白通过与P蛋白结合，抑制P蛋白的NLS功能。因此，有人提出BDV蛋白的细胞内定位可能受到蛋白质-蛋白质相互作用的调节（准备提交）。