Imaging analysis of ER-mitochondria contact sites in living cells
活细胞内质网-线粒体接触位点的成像分析
基本信息
- 批准号:21K06149
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
小胞体-ミトコンドリア接触領域(EMCSs)は、カルシウムイオン輸送や脂質輸送などの細胞活動においての重要な役割を果たしていることが明らかにされてきているが、生細胞中でのEMCSsの定量やダイナミクスの解析は進んでいない。本研究では、2量体型蛍光タンパク質を利用したプローブを用いてEMCSsのライブセルイメージングを行い、そのダイナミクスを解析し、その制御機構とEMCSsが関与する生理機能のメカニズムの解明を目指す。特に、EMCSのダイナミクスとその機能の発現との相関を解析し、カルシウムイオン輸送の制御機構の分子基盤の解明を目指す。今年度、アルツハイマー病の発症に関わるアミロイドβペプチド(Aβ)のEMCSsの動態に対する影響を解析した。Aβは凝集し細胞内にカルシウムイオンを流入させ細胞死を誘導する。その際、ミトコンドリア・カルシウムイオン濃度も上昇させることが報告され、Aβ誘導の細胞死に寄与する可能性が示唆されている。アルツハイマー病モデル動物やAβを作用させた細胞では、EMCSs量や構成分子の発現が亢進していることから、Aβ作用においてEMCSsの関与が注目されている。実際、培養細胞にAβ刺激を行うとミトコンドリア内カルシウムイオン濃度の緩やかな上昇とともにEMCSsのシグナル量増加が誘導された。詳細な解析によりEMCS数の増加とともに個々のEMCSsが大きくなっていることができた。すなわち、EMCSsが変化しミトコンドリアへのカルシウムイオン移動を増強していると考えられている。この他、ミトコンドリアへのカルシウムイオンの移行を担うミトコンドリア・カルシウム・ユニポーターの機能阻害が、線虫の加齢やジストロフィー症モデルでの体壁筋機能減退を抑えることを見出した。
尽管内质网状接触区域(EMCSS)已被证明在细胞活性中起着重要作用,例如钙离子转运和脂质转运,活细胞中EMCSS的定量和动态分析尚未进展。在这项研究中,使用二聚体荧光蛋白进行探针进行EMCSS的活细胞成像,并将分析这些动力学,并阐明了涉及EMCSS的调节机制和生理功能的机制。特别是,我们旨在分析EMC的动力学与其功能的表达之间的相关性,并阐明钙离子转运的调节机制的分子基础。今年,我们分析了淀粉样β肽(Aβ)对EMCSS动力学的影响,EMCSS参与了阿尔茨海默氏病的发作。 Aβ聚集体并通过影响钙离子诱导细胞死亡。目前,据报道,线粒体钙离子的浓度也增加,这表明Aβ诱导的细胞死亡可能有助于Aβ诱导的细胞死亡。随着EMCS的量和成分分子的表达增加,EMCS在阿尔茨海默氏病和细胞上模仿的Aβ作用动物的参与吸引了人们的注意。实际上,培养细胞中的Aβ刺激引起了EMCS的信号水平的升高,同时线粒体中钙离子浓度的逐渐增加。详细的分析使各个EMCS随着EMCS的数量增加。换句话说,人们认为EMCS会改变并增强钙离子向线粒体的迁移。此外,我们发现抑制线粒体钙单位蛋白的功能,这些钙是导致钙离子向线粒体转移的抑制作用,从而抑制了线虫和神经营养不良模型中体壁肌肉功能的下降。
项目成果
期刊论文数量(22)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
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- 通讯作者:東端 晃
Mechano-sensing of mitochondria in cultured animal cells
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- DOI:
- 发表时间:2023
- 期刊:
- 影响因子:0
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- 通讯作者:Higashitani A
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- DOI:10.1016/j.abb.2021.108873
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:3.9
- 作者:Ulla Anayt;Uchida Takayuki;Miki Yukari;Sugiura Kosuke;Higashitani Atsushi;Kobayashi Takeshi;Ohno Ayako;Nakao Reiko;Hirasaka Katsuya;Sakakibara Iori;Nikawa Takeshi
- 通讯作者:Nikawa Takeshi
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