肝実質細胞の部位差に基づく領域区分と各種血管樹との肝葉内立体配置の観察

基于肝实质细胞区域差异和肝叶内不同血管树三维排列的区域划分观察

基本信息

批准号：
13770017
负责人：
石川朋子
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

肝葉内組織構築を立体的に捉えることを目的とし、本年度は、肝葉に領域区分をもたらす肝細胞の部位差の発現と肝細胞索の形成過程について、二次元および三次元観察と形態計測を行った。スンクス胎生22、24、25、26、28、29日、生後0、2、4、11、16日および成獣は、ザンボニ液灌流固定後、肝臓を1ないし1.5μmのトルイジンブルー染色エポン連続切片とし以下の観察に供した。二次元形態計測では、小葉間静脈と中心静脈の間の領域に分布する肝細胞切片のうち、核を含むものを対象とし、肝細胞の面積、形状係数を測定、数値化した。三次元観察および形態計測では、1本の肝類洞が小葉間静脈から分岐し中心静脈に至るまでを連続的に追跡し、これに接するすべての肝細胞と共に立体再構築を行い、肝細胞の体積、形状係数を測定、数値化した。胎生期の肝臓ははじめ造血細胞優位であるが、造血巣の衰退に伴い肝細胞索が発達する。形態計測および三次元観察から、肝細胞の成長および肝細胞索の形成過程は、以下の4段階に分けられた。(1)観察した胎生22〜28日:肝細胞は不定形を呈し、造血巣間に散在する時。(2)胎生29日〜生後0日:肝細胞はグリコーゲンを蓄積、特に門脈域では丸みを帯び、肝細胞索がほぼ完成する時。(3)生後2〜4日:肝細胞はグリコーゲンを消費し、特に中心静脈域で不定形を呈し、肝細胞索が再び不完全になる時。(4)生後11〜16日:肝細胞はほぼ均一に丸みを帯びた多角形を呈し、門脈域で大きく中心静脈域で小さいというスンクス特有の顕著な部位差を示し、肝細胞索が完成する時。以上の結果より、スンクス肝細胞の形態的部位差は出生直前に発現し、生後成長に伴いさらに顕著になること、肝細胞索は出生直前に形成されるが、出生直後のグリコーゲン消費に伴い一時不完全となったのち、生後16日までには再形成され完成することが明らかとなった。

为了在肝叶内3D查看组织构建的目的，今年我们进行了二维和三维观察结果以及对肝细胞中位点差异表达的表达的形态测量，从而导致肝叶区域分裂以及肝细胞索的形成过程。 Sunx胚胎寿命22、24、25、26、26、28、29、2、2、4、11、16、16和成年人在灌注Zamboni液体后，肝脏在1至1.5μm处用甲苯胺蓝染色的Epon串联染色，并经过以下观察结果。在二维形态学中，测量和定量测量和定量，分布在腔间静脉和中央静脉之间的肝细胞切片中。在三维观察和形态学中，从腔间静脉到中部静脉连续跟踪一个肝窦，并与所有与之接触的肝细胞一起进行了空间重构，并测量和定量了肝细胞的体积和形状系数。胎儿阶段的肝脏最初具有主要的造血细胞，但随着造血窝的下降，肝细胞索会发展。从形态计量学和三维观察中，将肝细胞的生长和肝细胞索的形成分为以下四个阶段：（1）观察到的胎儿寿命22-28：当肝细胞表现出无定形形状并散布在造血巢之间。（2）出生后29至0天的胚胎天：肝细胞会积聚糖原，并且在肝细胞索几乎完成时，尤其是在门静脉中，尤其是在门静脉中。（3）出生后2-4天：肝细胞食用糖原，尤其是当它们在中央静脉区域表现出无定形的形状时，肝细胞索再次变得不完整。（4）出生11-16天后：肝细胞表现出几乎均匀的圆形多边形形状，在Sunx中有显着差异，门静脉区域较大，并且中央静脉区域很小，当肝细胞索完成时。从上述结果可以表明，在出生前表达了Sunx肝细胞形态学位的差异，并且随着产后生长而变得更加明显。尽管肝细胞绳在出生前成立，但由于出生后的糖原消耗而暂时不完整，然后在出生的第16天之前重塑并完成。