エストロゲン受容体以外の核内受容体を介した性分化かく乱のメカニズム

雌激素受体以外的核受体介导的性分化破坏机制

• 批准号: 13833001
• 负责人: 池田 やよい
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13833001/
• 关键词: エストロゲン; 卵巣; 核内受容体; 内分泌かく乱; SF-1; 性分化

新生児期のラットはヒトの妊娠初期の胎児に相当し、性分化および卵巣を含む各器官発生に非常に重要な時期である。この新生仔期ラットに、合成エストロゲンとして知られているエストラジオールベンゾエイト(EB)を暴露し、その後の成長過程で起こる卵巣分化異常の分子メカニズムについての解析を行った。方法は、EBを生後1日から5日の連続5日間皮下注射により雌ラットに投与し、その後生後7日目、14日目、21日目に卵巣を摘出し、卵巣分化に関わる各因子の発現の変化を調べた。定量的解析は、RT-PCR法、ウエスタンブロット法を用いて遺伝子レベル、蛋白レベルでの発現をそれぞれ調べた。定性的解析は、卵巣を固定、パラフィン包埋後、8ミクロンの厚さの連続組織切片を作成し、in situハイブリダイゼーション法、免疫組織化学法を用いて遺伝子レベル、蛋白レベルでの発現をそれぞれ調べた。組織レベルでの形態異常はHE染色により解析した。以上の解析の結果、転写調節因子SF-1とその下流で制御されているステロイド合成酵素遺伝子、および二種のエストロゲン受容体の発現に定性的、定量的ともに変化が認められた。また、卵胞の発育の抑制が認められ、発育卵胞で発現するSF-1制御因子MISの発現が亢進していることが明らかとなった。この結果から、合成エストロゲンEBが、SF-1およびエストロゲン受容体を介して相互作用し、卵巣分化の過程でステロイドホルモン合成及び卵胞の発育に抑制的効果を与え、その結果卵巣の分化異常が引き起こされたという分子メカニズムの可能性が示唆された。

新生儿大鼠对应于人类怀孕早期的胎儿，对于包括卵巢在内的器官的性别分化和发展非常重要。将这种新生大鼠暴露于雌二二醇苯甲酸酯（EB），称为合成雌激素，并分析了随后生长过程中发生的卵巢分化异常的分子机制。该方法是通过皮下注射从出生后1到5天后通过皮下注射给雌性大鼠，然后在出生后的第7、14和21天去除卵巢，并检查了卵巢分化涉及的每个因素的表达变化。进行定量分析以使用RT-PCR和Western印迹检查基因和蛋白质水平的表达。定性分析涉及固定卵巢和嵌入石蜡，制备了8微米的串行组织切片，并分别使用原位杂交和免疫组织化学检查了基因和蛋白质水平的表达。通过染色分析了组织水平的形态异常。通过上述分析的结果，在转录调节剂SF-1的表达中观察到了定性和定量变化，其下游调节的类固醇合酶基因以及两个雌激素受体。此外，卵泡发育得到了抑制，并且发现MIS的表达是在发育中的卵泡中表达的SF-1调节剂的表达。这些结果表明，一种分子机制是合成雌激素EB通过SF-1和雌激素受体相互作用，并且在卵巢分​​化过程中对类固醇激素的合成和卵泡发育具有抑制作用，从而导致异常卵巢卵巢分化。

项目成果

Ikeda, Y., Nagai, A., Ikeda, M., Hayashi, S.: "Increased expression of Mullerian-inhibiting substance correlates with inhibition of follicular growth in the developing ovary of rats treated with E2 benzoate"Endocrinology. 143. 304-312 (2002)

Ikeda, Y.、Nagai, A.、Ikeda, M.、Hayashi, S.：“苗勒氏管抑制物质的表达增加与用苯甲酸 E2 治疗的大鼠发育中的卵巢中卵泡生长的抑制相关”内分泌学。