小腸上皮細胞の分化過程における異物排泄ポンプの生理的意義

异物排泄泵在小肠上皮细胞分化过程中的生理意义

• 批准号: 13771370
• 负责人: 伊藤 晃成
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771370/
• 关键词: 小腸; 分化; グルタチオン; MRP; mRNA

昨年度までの検討により、Multidrug resistance-associated protein (MRP)2は小腸上皮において分化過程で誘導を受けることが示された。その生理的意義を明らかにする上で上流の転写因子をひとつひとつ調べることは重要である。そこで、本年度はMRP2のプロモーター領域について、小腸分化過程での転写制御メカニズムに関してIEC6細胞を用いて検討を行った。その結果、1.IEC6において、小腸分化促進転写因子のCdx2を細胞に強制発現させ、培養を続けることでMRP2の発現が誘導される2.Cdx2を一過性に発現してもMRP2の発現は誘導されない3.IEC6細胞においてMRP2のプロモーター領域に関して順次欠失させた場合においても有意に転写活性が変化する部位は見出されないということが明らかとなった。以上の研究よりMRP2は確かに分化過程で誘導されるが分化の引き金となるCdx2による直接のMRP2プロモーター部位への作用では無く、むしろ分化過程における二次的な誘導と考えられた。MRP2は小腸に限らず他臓器においても分化時に誘導されることが知られており、Cdx2などの小腸特異的な分化因子よりむしろ、その下層に位置する臓器間で共通の転写制御因子によって制御されていることが示唆された。以上の結果は、今後の研究の進め方を決める上で有用な情報となると思われる。

直到去年的一项研究表明，在小肠上皮的分化过程中诱导多药相关蛋白（MRP）2。重要的是要一一检查每个上游转录因子，以阐明其生理意义。因此，今年，我们研究了使用IEC6细胞的小肠分化过程中转录调节的机理。结果，据揭示了1。在IEC6中，CDX2（促进小肠分化的转录因子）被迫在细胞中表达MRP2，并且在培养中继续表达MRP2的表达。 2。即使CDX2瞬时表达，也不会诱导MRP2的表达。 3。即使在IEC6细胞中依次删除MRP2启动子区域，没有转录活性显着改变的位点。基于上述研究，MRP2肯定是在分化过程中诱导的，但是人们认为触发分化的CDX2不是对MRP2启动子位点的直接影响，而是在分化过程中的二次诱导。众所周知，MRP2不仅在小肠中的分化过程中，而且在其他器官中也是在分化过程中，这表明它是由位于其下方器官之间的常见转录调节器控制的，而不是小肠特异性分化因子（例如CDX2）。以上结果可能是决定如何进行未来研究的有用信息。

项目成果

Tieson Li, Kousei Ito, Toshiharu Horie: "Transport of Fluorescein-methotrexate by Multidrug Resistance-associated Protein 3 in IEC-6 cells"American Journal of Physiology. (in press). (2003)

Tieson Li、Kousei Ito、Toshiharu Horie：“IEC-6 细胞中多药耐药相关蛋白 3 转运荧光素-甲氨蝶呤”美国生理学杂志。

Bin Ji, Kousei Ito, Hiroshi Suzuki, Yuichi Sugiyama, Toshiharu Horie: "Multidrug Resistance-Associated Protein2 (MRP2) Plays an Important Role in the Biliary Excretion of Glutathione Conjugates of 4-Hydroxynonenal In Rats"Free Radical Biology and Medicine

Bin Ji、Kousei Ito、Hiroshi Suzuki、Yuichi Sugiyama、Toshiharu Horie：“多药耐药相关蛋白 2 (MRP2) 在大鼠 4-Hydroxynonenal 谷胱甘肽缀合物的胆汁排泄中发挥重要作用”自由基生物学和医学

伊藤晃成, 鈴木洋史, 杉山雄一: "Single amino acid substitution of rat MRP2 results in acquired transport activity for taurocholate"American Journal of Physiology Gastrointestinal and Liver Physiology. 281. G1034-1043 (2001)

Akinari Ito、Hiroshi Suzuki、Yuichi Sugiyama：“大鼠 MRP2 的单一氨基酸取代导致牛磺胆酸的获得性转运活性”美国生理学杂志胃肠道和肝脏生理学 281. G1034-1043 (2001)。

伊藤晃成, 鈴木洋史, 杉山雄一: "Charged amino acids in the transmembrane domains are involved in the determination of the substrate specificity of rat Mrp2"Molecular Pharmacology. 59. 1077-1085 (2001)

Akinari Ito、Hiroshi Suzuki、Yuichi Sugiyama：“跨膜结构域中的带电氨基酸参与大鼠 Mrp2 底物特异性的测定”《分子药理学》59. 1077-1085 (2001)。