レンサ球菌群に共有される新奇なフィブロネクチン結合性物質の解析

链球菌共有的新型纤连蛋白结合物质的分析

基本信息

批准号：
13771274
负责人：
五月女さき子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

フィブロネクチン(Fn)は細胞外基質タンパクの1つであり、感染症の発症においては細菌の標的物質として重要視されている。私の所属する研究室では、心内膜炎原因菌のひとつであるGranulicatella (Abiotrophia) adiacensの固相化ヒトFnへの付着能を阻害する抗Fnモノクローナル抗体(mAb ; Fynit-I01)を樹立し、これがFn分子のポリペプチド中央領域を認識することを明らかにしている。菌体表層のFn結合物質を同定・解析するための菌体受容体を認識するmAbを得る目的でFynit-I01に対する抗イディオタイプmAbの作製を試みた。Fynit-I01を同系統のBALB/cマウス、アロジェニックのA/Jマウスに免疫したところ、Fynit-I01に対して結合するものが18株、Fynit-I01およびG.adiacensの両者に結合性を有する可能性のあるものが28株得られた。抗イディオタイプ抗体産生ハイブリドーマ細胞46株のにおけるG.adiacensとFynit-IO1の両者に結合性を有するかどうか更にELISAにて検討したところ、1株に反応がみられた。この1株は、G.adiacensの表層物質を認識するモノクローナル抗体として確立された。今回用いた機能的抗リガンド抗体に対する抗イディオタイプ抗体を作製することによって、リガンドの受容体を解析するという方法論が、細菌のフィブロネクチン結合性物質の解析に有用であることが示唆された。

纤连蛋白（FN）是细胞外底物蛋白之一，被视为传染病发作中细菌的靶向物质。在我的实验室中，我建立了一种抗FN单克隆抗体（mAb; fynit-i01），一种抗FN单克隆抗体（MAB； Fynit-i01），抑制对颗粒（Abitrophia）adiacensensensementellicatella的固化人Fn的粘附心内膜炎的病毒原因。这表明这识别出FN分子的多肽中心区域。为了获得识别和分析细菌受体以识别和分析细菌表面的FN结合材料的mAB，我们试图创建针对Fynit-i01的抗iidotiget型mAb。当Fynit-i01与相同类型的BALB/C小鼠免疫时，A/J小鼠有18个与Fynit-I01结合的共享，Fynit-i01和G.Adiacens连接了28件事。在ELISA中检查了抗体型抗体产生的杂交瘤细胞46股G. adiacens和Fynit-io1，并反应一种菌株。该一种被确定为一种单克隆抗体，可以识别G. adiacens的表面物质。有人提出，这次使用的抗染色型抗体分析配体受体的方法学可用于分析细菌中的纤连蛋白质物质。