HIV感染時のNF-κB・Tatトランスクリプトームおよび宿主遺伝子発現の解析

HIV感染过程中NF-κB/Tat转录组和宿主基因表达分析

基本信息

批准号：
13226109
负责人：
手塚俊文
金额：
--
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226109/
关键词：
エイズ HIV 宿主因子転写因子NF-κB 感染症転写蛋白間相互作用 Tat

项目摘要

HIVプロウイルスからの遺伝子発現は、主に宿主細胞の転写活性化因子NF-κBとウイルスのコードするTatによって段階的に制御されている。本研究では、(1)HIV転写・複製に主要な役割を果たす宿主因子NF-κBおよびHIV由来因子Tatと相互作用する宿主因子の同定とその機能解析を行う。(2)NF-κB活性化あるいはTat発現細胞での宿主細胞遺伝子発現プロフィールの変化の解析を行い、それらの遺伝子発現の変化が宿主病態に与える影響を検討する。我々は、NF-κBのp65サブユニット(RelA)と相互作用する因子、RelA associated inhibitor(RAI),Groucho family genes(Grg)などを同定してきた。RAI、GrgはNF-κBのp65サブユニットに結合しその転写活性を抑制する。本年度の成果として、我々は酵母two-hybrid法によりp65と相互作用する因子TLS/FUSを同定した。TLS/FUSはNF-κBのコアクティベーターとして働き、p65と結合することによりその転写活性を増強させることを見出した。さらに、我々はRNA helicaseA(RHA)がNF-κBのp65サブユニットに結合することを見出した。RHAはp65,TNF-α,NIK(NF-κB inducing kinase)によるNF-κB依存性遺伝子の発現を増強した。一方、RHAのATP結合ドメインに変異を導入したdominant negative RHA(RHAmt)を遺伝子導入するとp65,TNF-α,NIKによるNF-κB依存性レポーターの発現が抑制された。また、RHAmtはp65によるHIV-LTRの活性化を抑制した。これらの結果より、RHAもNF-κBのコアクティベーターとして働き、HIVの転写に関わる可能性が示唆された。

来自HIV病毒的基因表达逐渐由编码宿主细胞和病毒转录因子NF-κB的TAT逐渐控制。在这项研究中，（1）鉴定并鉴定出在HIV转移和重复中起主要作用的宿主因子NF-κB和HIV衍生因子TAT的鉴定和功能分析。（2）分析NF-κB激活或TAT表达细胞中宿主细胞遗传表达谱的变化，并检查了这些基因变化对宿主路径的影响。我们已经确定了与NF-κBp65亚基（RELA），RELA相关抑制剂（RAI），Groucho家族基因（GRG）相互作用的因素，等等。 RAI和GRG与NF-κBp65亚基结合以抑制其转录活性。由于今年，我们已经确定了通过酵母两杂交方法与p65相互作用的因子TLS/FUS。 TLS/FUS是NF-κB上的核心恒星，发现与p65的结合增强了其转录活性。此外，我们发现RNA Helicasea（RHA）与NF-κBp65亚基结合。 RHA通过p65，TNF-α，NIK（NF-κB诱导激酶）提高了NF-κB依赖性基因的表达。另一方面，在RHA ATP结合结构域中引入突变的主要阴性RHA（RHAMT）的遗传引入抑制了p65，TNF-α和NIK抑制NF-κB依赖性记者的表达。 Rhamt还抑制了p65的HIV-LTR激活。这些结果表明，RHA也是NF-κB核心恒星，可能与HIV转移有关。