三量体Gタンパク質G12ファミリーによる神経機能調節の研究

三聚体G蛋白G12家族神经元功能调节研究

• 批准号: 01J03814
• 负责人: 山口 賀章
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J03814/
• 关键词: G12ファミリー; Rho; GPCR; 細胞内局在; PP5; PP5-TPR; thrombin; LPA; yeast two-hybrid; 神経可塑性; 細胞膜移行

Gα12/13の新規活性測定法の開発と、Gα12/13のレセプターとの共役の特異性決定因子の解明私は、2002年にセリンスレオニンフォスファターゼ5(PP5)が三量体Gタンパク質G12ファミリーの新規エフェクターであることを見いだした。2003年に私はPP5のTPRドメインが活性型Gα12/13と特異的に結合するという特性を利用して、TPRドメインによるpull-downにより、Gα12/13の活性を測定する新規活性測定法を開発した。Gα12とGα13は、下流でRhoという共通の分子を利用する一方、上流のレセプターとの共役に関しては、それぞれに特異性があることが、Gα12/13のドミナントネガティヴ体を用いて示されていた。そこで、私は上記の新規アッセイ法を用いてthrombin及びLPAがGα12及びGα13を、それぞれ特異的に活性化すること、及びこの特異性が、Gα12/13のN末端アミノ酸配列の差に起因することを解明した。近年、神経細胞において、Gα12は細胞体、Gα13はneuropilと局在が異なることが報告された。このことから、Gα12/13とレセプターの細胞内局在の違いが、それらの共役及びシグナリングに重要であると考えられる。

开发一种测量Gα1/13活性的新方法，并阐明了与Gα12/13的受体共轭的特异性决定因素。 2002年，我发现丝氨酸苏氨酸磷酸酶5（PP5）是三聚体G蛋白G12家族的新型效应子。在2003年，我开发了一种新型的活性测定法，该测定法通过TPR域下拉来测量Gα12/13的活性，利用TPR域特异性结合与活动Gα12/13的性质。虽然Gα12和Gα13利用了一种称为Rho下游的常见分子，但已证明它们使用Gα12/13的主要负面形式与上游受体的共轭具有特异性。因此，我使用上述新测定法对凝血酶和LPA进行了阐明，分别特异性地激活了Gα12和Gα13，并且这种特异性是由于Gα12/13的N末端氨基酸序列的差异所致。最近，据报道，Gα12与神经元的定位不同，而Gα13与Neuropil不同。这表明Gα12/13的亚细胞定位和受体的结合和信号传导很重要。

项目成果

Yoshiaki Yamaguchi et al.: "N-terminal Short Sequences of α subunits of G12 family defermine selective couplings to Receptors."The Journal of Biological Chemistry. 278巻・17号. 14936-14939 (2003)

Yoshiaki Yamaguchi 等人：“G12 家族 α 亚基的 N 端短序列决定与受体的选择性偶联。”《生物化学杂志》第 278 卷，第 17 期。14936-14939 (2003)