細胞周期制御因子による癌細胞の分化、増殖、アポトーシスのスイッチ機構とシグナル伝達

细胞周期调节因子对癌细胞分化、增殖和凋亡的开关机制和信号转导

基本信息

批准号：
12215141
负责人：
土橋洋
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215141/
关键词：
cyclin cdk PC12 cdc2 アポトーシス細胞分化

项目摘要

本年度はラット褐色細胞腫(PC12),ヒト肺神経内分泌癌から樹立した細胞株、血球系細胞等の系で癌抑制遺伝子、細胞周期制御因子蛋白の過剰発現、発現抑制による分化やアポトーシスの誘導の有無、その際下流で機能する分子の解析を行った。1)PC12のNerve growth factor(NGF)による分化過程で癌抑制遺伝子蛋白APCの発現は亢進する(Biochem.Biophys.Res.Comm.1996)。逆にアンチセンスベクター導入実験により、APCは分化の初期段階に必須であるが、分化形質の保持には不要である事を明らかにした。(Biochcm.Biophys.Res.Comm.2000)2)PC12のNGFによる分化はcdk2,cdc2単独の過剰発現で阻害される。しかし、アンチセンセや特異的阻害剤を用いた実験から分化誘導にはcdk2,cdc2両方の活性の抑制が必要であった。つまりPC12細胞の分化はcdc2,cdk2両方によってredundantに制御されている事が予想された。(J.Biol.Chem.2000,第59回日本癌学会、第23回日本分子生物学会発表)3)PC12の他,我々が樹立した肺小細胞癌、大細胞神経内分泌癌、血球系、RB蛋白質が不活化した細胞株等を用いて種々のcyclins,cdkの潜在機能を検索した結果、どの株でもcdk4,cyclin D1の過剰発現によりアポトーシスが誘導された。この事よりcdk4,cyclin D1は比較的普遍的なアポトーシスのメディエーターとして機能しうる可能性が予想された。(2000年、第59回日本癌学会、第23回日本分子生物学会発表)4)3)の系路を解析するためPC12に一過性にcdk4を過剰発現させた細胞を染色後、ソーティングし、親株とのサブトラクションにより変動遺伝子を検索した。その結果、既知のプロテアーゼにホモロジーを有する新規の遺伝子を含む数種の遺伝子がクローニングされ、現在解析中である。(2001年、第24回日本分子生物学会発表予定)

今年，我们分析了肿瘤抑制基因和细胞周期调节蛋白在大鼠嗜铬细胞瘤（PC12），人肺肺神经内分泌癌和其他系统中建立的细胞中，通过抑制和细胞的抑制作用，以及降低了降低的抑制作用。 1）在通过PC12的神经生长因子（NGF）分化过程中，肿瘤抑制基因蛋白APC的表达得到了增强（Biochem.biophys.res.comm.1996）。相反，反义矢量引入实验表明，APC对于分化的早期阶段至关重要，但对于保留分化特征不是必需的。（Biochcm.biophys.Res.Comm.2000）2）单独的CDK2和CDC2的过表达抑制了NGF对PC12的分化。但是，使用抗分裂和特定抑制剂的实验需要抑制CDK2和CDC2的活性以诱导分化。换句话说，据预测，PC12细胞的分化是由CDC2和CDK2冗余控制的。（J.Biol。Chem。2000，在第59届日本癌症学会和第23届日本分子生物学学会上发表）3）除PC12外，我们还搜索了使用小细胞肺癌，大细胞神经肺癌，由RB蛋白质的细胞和APOPRISTION INDES（APOPRISTION）在cyclin和cdk中的潜在功能，以及rb protivain in cy of rb protivain and rb protistive。细胞周期蛋白D1。这表明CDK4和Cyclin D1可以充当凋亡的相对普遍的介体。（由第59届日本癌症学会和2000年日本分子生物学协会提出）4）3）3）分析系统的界面，对PC12上瞬时过表达CDK4的细胞进行了染色，分类，并通过父母菌株的减法来搜索可变基因。结果，已经克隆了几个具有与已知蛋白酶同源的新型基因的基因，目前正在分析中。（第24届日本分子生物学学会将于2001年提出）