3次元アッセンブリによる環境ホルモンターゲテイング系の効率化

利用 3D 组装提高内分泌干扰物靶向系统的效率

• 批准号: 12019266
• 负责人: 久保 いづみ
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Soka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12019266/
• 关键词: リポソーム; 3次元アッセンブリ; ノニルフェノール; ビスフェノールA; ベンゾフェノン; フタル酸エステル; 構造変化; 吸光度測定

リポソーム及びタンパク分子から形成される3次元アッセンブリはリポソームの表面電荷密度とタンパク分子中の荷電密度のバランスにより直径1〜10μmの安定な3次元構造を形成する点に特徴があるが、環境ホルモンのような脂溶性の物質はこの3次元コンプレックスの疎水性領域に容易に浸透し、その構造に変化をもたらす。本研究では、この3次元アッセンブリを細胞膜のモデルとし、内分泌かく乱物質(環境ホルモン)を評価する方法と、その効率化について検討した。環境ホルモンとしては、ノニルフェノール、ベンゾフェノン,ビスフェノールA,フタル酸エステルをとり挙げた。あらかじめ調製された3次元アッセンブリに、それぞれの物質を室温、または37℃で作用させて、経時的に吸収スペクトル変化を計測した。3次元アッセンブリの構造が変化することにより、この粒子による光散乱に変化が生じた。この変化は37℃、300nmで最も顕著であったため、300nmにおけるみかけの吸収変化を指標とした。また、ノニルフェノールについては、測定後のスペクトルを平滑化処理することにより、10ppb〜100ppbの範囲での計測が可能であった。ベンゾフェノン、ビスフェノールA,フタル酸エステルであるbutylbenzyl-phthalateについては、いずれも0.1〜1ppmの範囲で計測が可能であったが、時間変化は物質毎に異なり、ビスフェノールAやベンゾフェノンでは10時間後、butylbenzyl-phthalateは12時間後、ノニルフェノールは24時間後が最適であった。環境ホルモン作用のないラウリル酸では変化が見られず、わずかな作用がある、dimethylphthalateでは変化はほとんどなかった。

由脂质体和蛋白质分子形成的三维组件的特征在于脂质体的表面电荷密度与蛋白质分子中的电荷密度之间的平衡，以及形成稳定的三维结构，其直径为1至10μm，但脂肪元素的含量为1至10μm导致其结构变化。在这项研究中，我们使用这种三维组装作为细胞膜的模型来检查评估内分泌干扰物（环境激素）的方法以及如何提高其效率。作为环境激素，北苯酚，苯苯甲酮，双酚A和邻苯二甲酸酯。每种材料在室温下或在37°C处应用于预先准备的3D组件上，以测量随着时间的推移吸收光谱的变化。三维组装结构的变化导致该粒子引起的光散射变化。这种变化在37°C和300 nm处最为明显，因此将300 nm时的吸收变化用作指数。此外，通过在测量后平滑光谱，可以在10 ppb至100 ppb的范围内测量北苯酚。苯甲酮，双酚A和邻苯二甲酸酯，丁苯二甲酸丁二醇均可以在0.1至1 ppm的范围内测量，但是时间变化因物质到实质而有所不同，最佳结果在10小时后，双酚A和苯基苯基苯甲酮，丁基苯甲酸苯甲酸苯甲酸苯甲酸苯甲酸苯胺酚后12小时后Nonylonnonel和24 nonylhonel和24小时。没有环境激素作用的Lauryl酸没有变化，对二甲基二甲酸二甲酸酯的影响很小。

项目成果

I.Kubo,H.Nagai: "Sulfate Binding Protein Modified Electrode as A Chemical Sensor"IEICE Transactions on Electronics. E83-C. 1035-1039 (2000)

I.Kubo，H.Nagai：“硫酸盐结合蛋白修饰电极作为化学传感器”IEICE Transactions on Electronics。

I.Kubo,K.Motoya and T.Ooseki: "Evaluation of environmental Endocrine Disruptor Based on its affinity of bR/liposome Complex"Proc.ISEB 2000. (in press).

I.Kubo、K.Motoya 和 T.Ooseki：“基于 bR/脂质体复合物的亲和力评估环境内分泌干扰物”Proc.ISEB 2000。（出版中）。

I.Kubo: "Investigation of detection system of environmental endocrine disruptors based on alteration of the structure of bR liposome complex"Technical report of IEICE. CPM2000-30. 7-12 (2000)

I.Kubo：“基于改变bR脂质体复合物结构的环境内分泌干扰物检测系统的研究”IEICE技术报告。