プロスタグランジンD_2によるアデノシン遊離の調節機構の解明

阐明前列腺素D_2对腺苷释放的调节机制

• 批准号: 00J01910
• 负责人: 岡田 哲也
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J01910/
• 关键词: アデノシン; 脳膜; 睡眠; アデノシンデアミナーゼ

前年度までに,アデノシンをイノシンへ代謝するアデノシンデアミナーゼ(ADA)がラット脳のくも膜に特異的に発現し,脳実質に比べ20-50倍のADA活性を示すことが明らかになった。さらに,ADA阻害剤であるコホルマイシンをクモ膜下腔へ投与した結果,睡眠物質であるアデノシンの投与局所における細胞外濃度が上昇することがわかった。クモ膜ADAを阻害することによりノンレム睡眠が選択的に誘発される脳波・筋電位の測定と同時にコホルマイシンをラットの前脳基底部クモ膜下腔へ連続微量注入を行い,クモ膜ADAの阻害による睡眠パターンへの影響を調べた。夜間(活動期)にコホルマイシン投与(400 pmol/0.4 mL/min)を5時間続けたところ,投与期間におけるノンレム睡眠の総量が増加することがわかった。この時,ノンレム睡眠の出現頻度には差がなく,エピソードの平均持続時間が延長していることが明らかになった。また,ノンレム睡眠時の脳波スペクトルを解析したところ,実験前日と投与時では大きな差は認められなかったが,深い睡眠の指標であるデルタ波(0.5-4Hz)の成分がわずかに増加していた。これらの結果は,前脳基底部クモ膜下腔におけるADA阻害によってノンレム睡眠が選択的に誘発されることを示す。クモ膜におけるアデノシン合成酵素5'-ヌクレオチダーゼ(5'-NT)の局在ラット脳およびクモ膜を用いて,アデノシンの合成酵素である5'-NTの脳内分布をノザンハイブリダイゼーションによって調べたところ,クモ膜において5'-NT mRNAが脳実質各部位に対して1.3-2.8倍強く発現していることがわかった。また,5'-NT活性測定においても,クモ膜は脳実質各部位に対して1.9-3.4倍高い活性を示した。これらの結果は,クモ膜では脳実質に比べアデノシンの代謝がより活発に行われていることを示している。

到上一年，据透露，腺苷脱氨酶（ADA）在大鼠脑的蛛网膜膜上特别表达，将腺苷代谢为肌苷，显示出ADA活性的20-50倍，其20-50倍。此外，ADA抑制剂的辅助霉素的给药表明，腺苷的细胞外浓度（一种睡眠物质）在局部增加。在大鼠的基础前脑的亚蛛网膜下腔空间中连续注入辅助霉素，从而通过抑制蜘蛛ADA选择性地诱导非REM睡眠，并研究了抑制蜘蛛ADA对睡眠模式的影响。夜间（活动阶段）继续5小时的辅助霉素（400 pmol/0.4 mL/min），发现给药期间的非REM睡眠总量增加。目前，据透露，非REM睡眠的发生频率没有差异，并且发作的平均持续时间延长了。此外，当在非REM睡眠期间分析EEG光谱时，实验和给药时间之间没有显着差异，但是Delta Wave（0.5-4Hz）的成分（0.5-4Hz）是深度睡眠的指标，略有增加。这些结果表明，非REM睡眠是通过ADA抑制在基础前脑的亚蛛网膜下腔中选择性诱导的。北部杂交研究了腺苷合成酶5'-核苷酸酶（5'-NT）在蜘蛛膜中的定位，5'-NT的脑分布（一种腺苷合成酶）的脑分布，发现5'-NT mRNA在每个脑脑膜中的蜘蛛膜膜中表现出1.3-2.8倍。此外，在5'-NT活性测量中，蜘蛛膜在每个脑实质区域的活性高1.9-3.4倍。这些结果表明，腺苷代谢在蜘蛛膜上比在脑实质中更活跃。