ポリコーム遺伝子群rae28による造血制御と白血病

多梳基因组rae28对造血的调节与白血病

基本信息

批准号：
11877167
负责人：
瀧原義宏
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1) ポリコーム遺伝子群の一つのrae28の造血における機能を解明する目的で、遺伝子欠損マウスを作製し解析した。rae28遺伝子欠損マウスにおいてはプロB細胞からプレB細胞に至る過程でB細胞の成熟障害が生ずるとともに、造血幹細胞の機能維持が損なわれていることを明らかにした。造血幹細胞の異常は発生の進行に伴って造血ヒラルキーの上位から波及的に進行し、造血幹細胞の自己複製に障害が存在することが推測された。これらの造血障害はrae28の遺伝子量依存的に生ずることがわかった。(2)小児B細胞白血病細胞におけるRAE28遺伝子の発現をRT-PCR法で検討した結果、43名中4名において発現が失われていることを見いだすとともに、制癌剤による治療によってRAE28遺伝子の発現が回復することを明らかにした。rae28の発現がB細胞の成熟に必須であることから、RAE28の発現の消失が白血病の発症に関与している可能性が考えれれた。RAE28の発現の消失を引き起こした分子レベルでの異常はサザン法ではみつからず、今後の課題である。(3)レトロウイルスベクターにrae28cDNA及びマーカーとしてGFPを組み込み、レトロウイルスを作製した。NIH3T3細胞を用いて、感染効率が十分高く、感染細胞にrae28タンパク質が高発現していることを確認し、rae28の高発現系確立に使用できるレトロウイルスであることを確認した。今後、造血幹細胞に導入し、造血幹細胞の動態制御を試みる予定である。

1）为了阐明多梳基因组成员rae28在造血中的功能，我们生成并分析了基因缺陷小鼠。我们发现，在rae28基因缺陷的小鼠中，B细胞在从pro-B细胞到pre-B细胞的过程中成熟受到损害，造血干细胞功能的维持受到损害。随着发育的进展，造血干细胞的异常从造血层次的顶部开始发展，这表明造血干细胞的自我更新存在障碍。发现这些造血障碍与 rae28 基因剂量有关。 (2)使用RT-PCR检测儿童B细胞白血病细胞中RAE28基因的表达，结果发现43名患者中有4名表达缺失，通过治疗恢复了RAE28基因的表达与抗癌药物。由于rae28表达对于B细胞成熟至关重要，因此认为RAE28表达缺失可能与白血病的发展有关。使用 Southern 方法未检测到导致 RAE28 表达丢失的分子水平异常，这仍然是未来的课题。 (3)通过将rae28cDNA和GFP作为标记整合到逆转录病毒载体中来创建逆转录病毒。使用NIH3T3细胞，我们证实感染效率足够高，并且rae28蛋白在感染细胞中高表达，证实该逆转录病毒可用于建立rae28高表达系统。未来，我们计划将其引入造血干细胞中，尝试控制造血干细胞的动态。