p53点突然変異マウス作成によるがん治療モデルの開発

通过创建p53点突变小鼠开发癌症治疗模型

基本信息

批准号：
11140219
负责人：
中村健司
金额：
$ 1.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は、個体発がんにおけるp53遺伝子の突然変異と腫瘍の組織特異性とに注目し、p53欠損マウスを作成し解析してきた。ヒトの腫瘍から検出されるp53遺伝子の変異は点突然変異が最も多く、さらに変異のホットスポットがいくつか存在する。特に、Li-Fraumeni症候群のホットスポットの1つである、R248W変異は、大腸がんや胃がんで多く検出される。また、R249S変異は、肝がんで多く検出される。これらヒト腫瘍より見い出されるp53遺伝子の点突然変異がドミナントネガティブに働く可能性を考えると、特定の点突然変異が腫瘍の組織特異性を決めている可能性がある。そこで本研究は、p53遺伝子点突然変異(R245W)マウスとp53遺伝子欠失変異マウスを作成し、両者を解析し比較検討した。p53遺伝子点突然変異(R245W)マウスに認められた自然発生腫瘍は、その多くが胸腺リンパ腫であり、ヒトが多く認められる腫瘍の種類(大腸がんや胃がん)とは異なっていた。さらに、p53遺伝子欠失変異マウスとp53遺伝子点突然変異マウスの寿命と自然発生腫瘍を経過観察した結果、腫瘍の種類や発症時期がとても類似していた。以上の結果から、変異p53(R245W)は発症する腫瘍の特異性には関与せず、機能喪失型の変異であることが明かになった。一方、p53遺伝子欠失変異マウスは、高頻度に胸腺にリンパ腫を発症し、生後6ケ月以内に死亡する。p53欠損マウスに、リンパ球系でのみ正常p53を特異的に発現する遺伝子を導入したトランスジェニックマウスを作成した結果、p53欠損マウスの多くの死因である胸腺リンパ腫が減少し延命した。すなわちp53遺伝子はがん抑制遺伝子として機能し、p53欠損マウスは正常p53を発現させることによって、胸腺リンパ腫を抑制できることが解った。本研究よりヒトの腫瘍で頻繁に検出されるp53遺伝子点突然変異(R245W)は、機能喪失型の変異であることが明かになった。そこで、p53遺伝子欠失変異マウスの実験と同様に、点突然変異に対して正常遺伝子を導入することで腫瘍が抑制できるかどうか検討したい。近年、p53をターゲットにしたヒトに対する遺伝子治療も始まり、一部良好な結果が報告されている。我々が開発したヒトに多い点突然変異によってひき起こされるがんの疾患モデルは、今後もがん治療において有効な情報が得られるものと期待される。

我们专注于p53基因的突变和单个癌变中肿瘤的组织特异性，并创建和分析了p53缺陷型小鼠。在人类肿瘤中检测到的p53基因中最常见的突变是点突变，也有几个热点突变。特别是，在结肠和胃癌中经常检测到R248W突变是Li-Fraumeni综合征的热点之一。另外，在肝癌中经常检测到R249S突变。鉴于这些人类肿瘤中发现的p53基因中的点突变可能会产生负面作用，因此某些点突变可能决定了肿瘤的组织特异性。因此，在这项研究中，制备了具有p53基因点突变（R245W）的小鼠和p53基因缺失突变的小鼠，并分析并进行了分析和比较。在p53基因点突变（R245W）小鼠中发现的天然肿瘤主要是胸腺淋巴瘤，与人类（结肠癌和胃癌）的肿瘤类型不同。此外，寿命和天然发生的p53-降低突变小鼠和p53-降低突变小鼠的肿瘤表明，发作的肿瘤类型和时机非常相似。以上结果表明，突变体p53（R245W）与发展的肿瘤的特异性无关，并且是功能丧失的突变。另一方面，p53基因缺失突变小鼠经常在胸腺中出现淋巴瘤，并在生命的前6个月内死亡。由于产生了转基因小鼠，这些小鼠被引入p53缺陷小鼠，其基因仅在淋巴细胞系统中特异性表达正常p53的基因，胸腺淋巴瘤（这是p53缺陷型小鼠死亡的原因）的降低和延长。换句话说，p53基因起着癌症抑制基因的作用，发现缺陷型小鼠可以通过表达正常的p53抑制胸腺淋巴瘤。这项研究表明，在人类肿瘤中经常检测到的p53基因点突变（R245W）是功能丧失的突变。因此，与p53基因缺失突变小鼠的实验类似，我们想研究是否可以通过将正常基因引入点突变来抑制肿瘤。最近，针对p53的人类基因治疗也已经开始，并且已经报道了一些积极的结果。我们已经开发了一种由人类常见的点突变引起的癌症疾病模型，预计将来它将继续提供有效的癌症治疗信息。