細胞親和性の異なるHIVの活性化CD4陽性T細胞における増殖性の解明とその制御

不同细胞向性的 HIV 激活 CD4 阳性 T 细胞增殖的阐明和控制

• 批准号: 10180226
• 负责人: 田中 勇悦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10180226/
• 关键词: HIV; CD4^+T; helper T cells; CCRS; CXCR4; monoclonal antibody; modulation; pathogenicity

HIV-1の活性化CD4+T細胞における増殖性および病原性を左右する宿主因子の一つとして、CD4+T細胞上のHIV-1第二受容体の発現制御が考えられる。これらの受容体の中で重要なものは、CCR5とCXCR4であり、より詳しい抗原構造の解析やin vivoでのウイルス中和実験に用いるため、それぞれの抗原に対して特異的なラット由来単クロン抗体の作製に成功した。CCR5に対する抗体T-227は、細胞外部N末領域を認識しWBにおいて40-41kDaのCCR5抗原分子を検出した。CXCR4に対する抗体は、細胞外部N末領域を認識する抗体(A145)と、細胞外部2ndloopを含む領域を認識認する抗体(A80)が作製できた。以上の特異的単クロン抗体と市販のマウス単クロン抗体を用いて、CD4+T細胞の多重染色を行い、freshな細胞にはCXCR4が多量に発現されるが、CCR5は陰性であることが確認された。刺激によってCCR5の発現が誘導されてくるが、CXCR4は、培養期間が長くなるにつれてその発現量は減少していった。特にCD4+Tクロンでは、CCR5陽性、CXCR4弱陽性の表現形のものが多かった。これらのクロン細胞は、マクロファージ親和性HIV-1に高い感受性を示したが、T細胞株親和性HIV-1には耐性か低い感受性であった。ところが、このT細胞を刺激することによってCCR5のdown-modulationとCXCR4のup-regulationが観察され、同時にこれらのクロン細胞は、T細胞株親和性HIV-1に高い感受性を示し、マクロファージ親和性HIV-1低い感受性を示すようになった。つまり、メモリー細胞と活性化早期細胞では、CCR5とCXCR4の発現は異なり、それぞれの発現量に比例してマクロファージ親和性HIV-1とT細胞株親和性HIV-1に対する感受性も異なることが示唆された(論文作成中)。

在活化的CD4+ T细胞中影响HIV-1的增殖和致病性的宿主因素之一是调节CD4+ T细胞上HIV-1第二受体的表达。在这些受体中，CCR5和CXCR4很重要，为了对抗原结构和体内病毒中和实验进行进一步的详细分析，我们成功地生产了针对每种抗原特异的大鼠衍生的单克隆抗体。 CCR5抗体T-227识别外部N末端区域，并检测到WB中40-41 kDa的CCR5抗原分子。针对CXCR4的抗体能够产生识别外部N末端区域和抗体（A80）的抗体（A145），该抗体识别包含外部2ndloop的区域。使用上述特异性单磷抗体和市售小鼠单克抗体，CD4+ T细胞进行了多次染色，尽管CXCR4在新鲜细胞中大量表达，但CCR5被证实为阴性。刺激诱导CCR5表达，但随着培养期的增加，CXCR4的表达水平降低。特别是，CD4+T-Crons具有CCR5阳性和CXCR4阳性的表型。这些Cron细胞非常容易受到巨噬细胞亲和力HIV-1的影响，但耐药性或不太容易受到T细胞系亲和力HIV-1的影响。然而，通过刺激这些T细胞，观察到CCR5的下调和CXCR4的上调，同时，这些CRON细胞对T细胞系亲和力HIV-1高度敏感，并且对巨噬细胞亲和力HIV-1的敏感性较低。换句话说，有人建议记忆细胞和早期激活细胞之间的CCR5和CXCR4表达有所不同，并且对巨噬细胞亲和力HIV-1和T细胞系亲和力HIV-1的敏感性与每个细胞的表达水平成正比（在论文中）。

项目成果

SUZUKI Y,KOYANAGI Y,TANAKA Y,その他 8名: "Determinant in human immunodeficiency virus type 1 for efficient replication under cytokine-induced CD4+ T helper 1(Th1) and Th2-type conditions" J.Virclogy. 73・1. 316-324 (1999)

SUZUKI Y、KOYANAGI Y、TANAKA Y 等 8 人：“1 型人类免疫缺陷病毒在细胞因子诱导的 CD4+ T 辅助细胞 1(Th1) 和 Th2 型条件下有效复制的决定因素”J.Virclogy 73・1。 -324 (1999)

OHSHIMA Y,YANG L-P,UCHIYAMA T 他5名: "OX40 costimulation enhances interleukin-4(IL-4) expression at priming and promores the differentiation of naire human CD4+T cells into high IL-4" Blood. 92・9. 3338-3345 (1998)

OHSHIMA Y、YANG L-P、UchiYAMA T 和其他 5 人：“OX40 共刺激可增强启动时白细胞介素 4 (IL-4) 的表达，并促进人类 CD4+T 细胞分化为高 IL-4”血液 92・9。 3338-3345 (1998)