網膜機能のシステム的解析

视网膜功能的系统分析

基本信息

批准号：
10164240
负责人：
金子章道
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10164240/
关键词：
アマクリン細胞持続性ナトリウム電流網膜ラット

项目摘要

アマクリン細胞は、網膜第2次シナプス層(内網状層)に樹状突起を広げる介在ニューロンであり、その多くはGABA作動性の抑制性ニューロンである。アマクリン細胞は無軸索であり、樹状突起でシナプス入力をうけ、かつ、シナプス出力も行っている。また、アマクリン細胞は、軸索を持たないにもかかわらず、活動電位を発生する。これまでにこの活動電位によってアマクリン細胞から強い抑制性シナブス出力が行われることを明らかとしたが、依然として、無軸索介在ニューロンにおける活動電位の伝導特性および活動電位の閾値下でのシナプス後電位の伝播特性については不明な点が多い。本研究では、単離培養したアマクリン細胞を用いて、アマクリン細胞の活動電位の発生を解析し、その基礎となるイオン電流を解析した。ラット新生仔から網膜アマクリン細胞を単離し7〜14日培養した。アマクリル細胞の同定はHPC-1/Syntaxinと、G油Aに対する免疫組織化学法により行った。これら培養網膜アマクリン細胞に対してパンチクランプ法を適用し、膜電位および電流記線を行った。単離アマクリン細胞を電流注入によって-60mVを越えて脱分極すると、受動的な膜として予測される電位よりも大きな脱分極を示した。この脱分極は電流注入終了後も約200msec持続し、その間に活動電位が発生した。持続性脱分極は、TTXによって抑制されたが、Co^<2+>では影響を受けなかった。電位固定の条件下ではTTX感受性の持続性電流が記録された。この電流の逆転電位はNa^+の平衡電位と一致した。以上の結果から、培養網膜アマクリン細胞にはTTX感受性の持続性Na^+電流が存在し、これにより持続時間の短い刺激でも、長い持続的な脱分極が引き起こされることが明らかとなった。したがって、介在ニューロンであるアマクリン細胞でのシナプス入力の統合には、持続性および一過性のNa^+電流が大きな役割を果たしていると考えられる。

无长束细胞是中间神经元，它们将树突扩散到视网膜（内部视网膜层）的二级突触层，其中大多数是GABA能抑制性神经元。无长熟细胞是轴突，并通过树突接收突触输入，还执行突触输出。尽管没有轴突，但无聚细胞也会产生动作电位。尽管到目前为止已经揭示了这种动作电位会导致紧密的抑制性肉毒cin症，但仍有许多未知的动作电位的传导特征和突触后电位的传播特性低于轴突中间神经元的动作电位阈值的传播特征。在这项研究中，我们使用分离的和培养的无长熟细胞分析了无长束细胞的作用电位的产生，并分析了基本离子电流。从大鼠新生儿中分离出视网膜团体细胞并培养7-14天。通过HPC-1/语法素鉴定淀粉细胞，并针对G油A进行免疫组织化学。将打孔夹方法应用于这些培养的视网膜悬链细胞，并进行了膜电位和电流报告。通过电流注射的分离的无长血管细胞的去极化超过-60 mV，其去极化大于被预测为被动膜的电势。当前注射完成后，这种去极化持续了约200毫秒，在此期间产生了动作电位。 TTX抑制了持续的去极化，但不受CO^<2+>的影响。在电压固定条件下记录了持续的TTX敏感电流。该电流的反向电势与na^+的平衡电位一致。从上述结果中可以揭示出对培养的视网膜无大细胞中对TTX敏感的持续Na^+电流的存在，即使刺激持续时间很短，也会导致长而持续的去极化。因此，据认为，持续和瞬态的Na^+电流在整合神经元间隔细胞的突触输入中起主要作用。