雌雄異株植物を用いた性染色体と生殖器官特異的遺伝子群に関する分子細胞学的解析

使用雌雄异株植物对性染色体和生殖器官特异性基因进行分子细胞学分析

基本信息

批准号：
10158203
负责人：
酒井敦
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、性染色体をもちXY型の性決定を行う雌雄異株植物メランドリウム(ヒロハノマンテマ、Silenelatifolia)を用いて生殖器官形成に関わる遺伝子群を単離・同定すると同時に、高等植物の性染色体にコードされる遺伝子群が生殖器官形成に果たす役割を明らかにすることである.特に、雄にしか存在しないY染色体は性決定において重要な役割を担っていると考えられるので、本研究では雄性生殖器官特異的に発現される遺伝子群およびY染色体特異的遺伝子群に解析を集中した.今年度の成果は以下のとおりである.(1) レーザーマイクロダイセクションを用いて単離されたY染色体由来の高度反復配列のひとつ、RMY1(repetitive sequence in microdissected Y chromosome)は、チェコのグループがマイクロダイセクションによりメランドリウムX染色体から単離したサプテロメア様配列X43.1に高いホモロジーを示した.FISH解析の結果、RMY1は常染色体を含む多数の染色体末端部分に局在を示したが、性染色体間では局在様式が異なっていた(X染色体は両端、Y染色体は一方の末端).この配列は性染色体の異型化を考察する上で有用な指標になると考えられる.(2) 10merのプライマーを用いて雌雄ゲノムDNAを鋳型とするRAPD解析を行い、雄DNAから特異的に増幅されてくるDNA断片を得た,ゲノミックサザンハイブリダイゼーションにより雄特異性を検討し、最も雄特異性が高いと思われたクローンについてSTS化を行い、雄特異的に単一のバンドが増幅されることを示した.inverse PCRにより、その周辺領域の取得を試みたところ、逆転写酵素様のタンパク質をコードし得るORFを含む約9.6kbpのクローンを得た.この配列はY染色体DNAのマーカーとして有用であるとともに、Y染色体特異的遺伝子の有力な候補である.

这项研究的目的是使用雄性植物肉类（Sirenelatifolia）（Sirenelatifolia）分离并鉴定参与生殖器官的形成的基因，该基因具有性染色体，并在本研究中对XY类型进行性测定。认为在染色体中编码的基因组在本研究中发挥了生殖器官的形成。 Y-染色体特异性基因的结果如下。分析，RMY1表明许多染色体末端，包括正常染色体，但性别染色体之间的局部格式不同（X染色体都是两端，Y染色体是一端）。性别染色体（2）使用男性基因组DNA作为男性基因组DNA，并从雄性DNA中进行了特异性的sousan sousan杂交。成为男性的特异性，并指出，当我试图用逆PCR获得周围区域时，单个带的特异性将被放大，我得到了约9.6kbp的克隆，包括ORF，可以编码蛋白质像逆转的全酶一样，同时，它是Y染色体特异性基因的有力候选者。