子宮体癌の組織分化に関する研究-硫酸化脂質の生物機能を中心に-

子宫内膜癌组织分化研究-聚焦硫酸脂的生物学功能-

基本信息

批准号：
08671927
负责人：
三上幹男
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

体癌由来細胞への硫酸化脂質関連酵素cDNAの遺伝子導入による亜株の作成、硫酸化脂質の発現量が異なる体癌由来培養細胞の組成分化度の解析の2つを目的とした平成8年度研究において以下に述べる結果を得た。11種の各種分化型由来培養細胞の硫酸化脂質及び糖脂質の組成を放射性同位元素を用いたメタボリックラベリング法により解析したところ、フコース含有糖脂質、シアル酸含有糖脂質及び硫酸化糖脂質の組成には11種の中であまり大きな変化が見られなかったのに対し、硫酸化脂質の1つであるコレステロール硫酸の組成が大きく変化した2種の細胞株が見られた。この2種の細胞株を用いて我々が新たに開発したコラーゲン包埋培養法を行うと、腺腔様の構造物が構築された。この腺腔様構造の電顕分析を行ったところ、内腔面に向かって微絨毛が観察された。また免疫染色を行ったところ、内腔面が染色された。よって、この腺腔様構造は腺腔の特徴を有していることが判明した。以上の結果より、コレステロール硫酸の発現の有無が腺腔構造の誘導に関与していることが示唆された。今後、この2つの細胞株に脱硫酸転移酵素cDNAを遺伝子導入し、コラーゲン包埋培養法を用いて腺腔構造の発現の有無を分析する予定である。

1996年，两个目标是通过将硫酸化脂质相关酶cDNA导入体癌来源的细胞中来创建亚株，并分析具有不同硫酸化脂质表达水平的体癌来源的培养细胞的成分分化程度。在研究中，我们获得了如下结果。通过使用放射性同位素的代谢标记法对源自各种分化类型的11种培养细胞中的硫酸化脂质和糖脂的组成进行了分析，发现了含岩藻糖糖脂、含唾液酸糖脂和硫酸化糖脂的组成。在 11 个细胞系中没有观察到重大变化，但有两个细胞系的硫酸胆固醇（一种硫酸化脂质）的组成发生显着变化。当我们使用这两种细胞系进行新开发的胶原蛋白包埋培养方法时，构建了腺腔样结构。当通过电子显微镜分析这种腺腔样结构时，在管腔表面观察到微绒毛。此外，当进行免疫染色时，管腔表面被染色。因此，发现这种腺腔样结构具有腺腔的特征。上述结果表明，硫酸胆固醇表达的存在与否参与了腺腔结构的诱导。未来，我们计划将脱硫转移酶cDNA导入这两种细胞系中，并利用胶原蛋白包埋培养方法分析腺腔结构表达的存在与否。