Elucidation of a mechanism of pathogenicity exerted by periodontopathic bacteria for exploring molecularly targeted drugs

阐明牙周病细菌的致病机制，探索分子靶向药物

基本信息

批准号：
22KJ2187
负责人：
森田真吉
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2187/
关键词：
歯学微生物学口腔細菌学インターフェロン

项目摘要

P. gingivalis と宿主細胞との間に生じる複雑な相互作用については数多くの研究がなされてきているが、活性化マクロファージにおける STAT1の発現制御に関する検討はほとんどなされていないのが現状である。そこで本年度は研究計画に基づきP. gingivalis感染時の活性化マクロファージにおける STAT1の発現低下を指標として、本菌が有する免疫抑制機能に関わる細菌側因子、宿主側因子双方の検討を行った。P. gingivalisが分泌するシステインプロテアーゼであるジンジパインの遺伝子欠損株を作製したところ、活性化マクロファージ感染時、野生株が持つ免疫抑制効果が損なわれることを見出した。また、P. gingivalisのATPaseの欠損株でもジンジパイン欠損株と同等、あるいはそれ以上の免疫抑制効果の解除が認められた。宿主側因子の探索では、低分子シグナル阻害化合物ライブラリーを用いて網羅的探索を行った。解析の結果、複数の薬剤に本菌依存的なインターフェロンシグナル抑制に対する阻害効果が認められたものの、いずれの薬剤も細胞毒性が強く、候補シグナルを絞り込んでいくためには今後さらなるより特異的な解析が必要であると考えられた。また、In vivoでの病態解析に先立ち、絹糸結紮による歯周炎誘発マウスモデルおよび露髄による根尖性歯周炎マウスモデルを作製し、骨量の変化を測定した。経時的に歯周組織や根尖周囲組織での骨量減少が確認でき、病態の評価に有用であることが示された。

尽管对于牙龈卟啉单胞菌和宿主细胞之间发生的复杂相互作用进行了许多研究，但目前对活化巨噬细胞中 STAT1 表达的调节的研究很少。因此，今年，根据我们的研究计划，我们以牙龈卟啉单胞菌感染期间活化巨噬细胞中STAT1表达的降低为指标，研究了参与该细菌免疫抑制功能的细菌和宿主因素。当我们创建一种缺乏牙龈蛋白酶（牙龈卟啉单胞菌分泌的半胱氨酸蛋白酶）基因的菌株时，我们发现野生菌株的免疫抑制作用在感染活化的巨噬细胞后受到损害。此外，牙龈卟啉单胞菌的ATP酶缺陷株也表现出与牙龈蛋白酶缺陷株同等或更强的免疫抑制作用的释放。在寻找宿主因素时，我们使用小分子信号抑制化合物库进行了全面的搜索。分析结果发现，有几种药物对这种细菌依赖性干扰素信号抑制具有抑制作用，但所有药物都具有高度细胞毒性，并且考虑将来需要进一步进行更具体的分析以缩小候选信号的范围。必要的。此外，在进行体内病理分析之前，我们建立了丝线结扎诱发的小鼠牙周炎模型和牙髓暴露诱发的根尖周炎小鼠模型，并测量了骨量的变化。随着时间的推移，牙周组织和根尖周组织中的骨质流失得到证实，表明该方法可用于评估病理状况。