Development of cancer metastasis inhibitor by selective control of adrenomedullin-RAMP2 and-RAMP3 systems

通过选择性控制肾上腺髓质素-RAMP2和-RAMP3系统开发癌症转移抑制剂

• 批准号: 22KJ1493
• 负责人: 田中 愛
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1493/
• 关键词: アドレノメデュリン; 腫瘍増殖; 癌関連線維芽細胞; 腫瘍微小環境; リンパ節転移; 血管恒常性維持; 高内皮細静脈

アドレノメデュリン（AM）は多彩な作用を有するペプチド因子である。 我々は、AMとその受容体活性調節タンパクRAMP2が血管の発生に不可欠であり、AMとRAMP2のノックアウトマウスが胎生致死であることを報告してきた。昨年度までの検討から、誘導型血管内皮細胞特異的 RAMP2 ノックアウトマウス(DI-E-RAMP2-/-)では、血行性転移のみならず、リンパ節転移も亢進することを見出した。DI-E-RAMP2-/-では、リンパ球を免疫応答の場であるリンパ節へと移行させる特殊な血管：高内皮細静脈(HEV)の内皮細胞が血管内腔に向かって剥離し、基底膜が肥厚するなどの形態異常を認めた。本年度は、もう一方の受容体活性調節タンパクである、RAMP3に着目した研究を進めた。転移予定先臓器の転移前の環境＝「転移前土壌」、さらには、癌を取り巻く微小環境におけるAM-RAMP3系の意義を検討した。我々は以前、RAMP3ノックアウトマウスに癌細胞を移植すると、腫瘍増殖や転移が抑制されることを報告した。本研究では、宿主側ではなく、癌細胞側のRAMP3遺伝子の欠損が、腫瘍増殖に与える影響を検討するため、CRISPR-Cas9法によって、RAMP3遺伝子を欠損したE0771乳癌細胞 (RAMP3-/-細胞)を樹立した。C57BL/6Jマウスに癌細胞の皮下移植実験を行うと、RAMP3-/-細胞移植群では、コントロール細胞移植群と比較して、腫瘍重量が有意に抑制された。RAMP3-/-細胞移植群では、癌関連線維芽細胞(CAF)のマーカーであるSM22αや、上皮間葉転換(EMT)誘導因子であるTGF-β1およびSnailの発現低下が認められた。RAMP3は癌微小環境においてCAFの悪性化に寄与していることから、癌治療における新たな治療標的となることが期待される。

肾上腺髓质素 (AM) 是一种具有多种作用的肽因子。 我们已经报道AM及其受体活性调节蛋白RAMP2对于血管发育至关重要，并且AM和RAMP2敲除小鼠具有胚胎致死性。根据截至去年的研究，我们发现诱导性血管内皮细胞特异性RAMP2敲除小鼠（DI-E-RAMP2-/-）不仅血行转移增强，淋巴结转移也增强。在 DI-E-RAMP2-/- 中，高内皮微静脉 (HEV) 中的内皮细胞（将淋巴细胞迁移到发生免疫反应的淋巴结的特殊血管）向血管腔分离，并出现形态异常（例如膜增厚）被观察到。今年，我们关注的是 RAMP3，另一种受体活性调节蛋白。我们研究了AM-RAMP3系统在靶器官转移前环境（转移前土壤）和癌症周围微环境中的重要性。我们之前报道过，当癌细胞被移植到 RAMP3 敲除小鼠体内时，肿瘤生长和转移受到抑制。在本研究中，为了检查癌细胞中而不是宿主中RAMP3基因缺失对肿瘤生长的影响，我们使用CRISPR-Cas9创建了缺乏RAMP3基因的E0771乳腺癌细胞（RAMP3-/-细胞）方法成立。当癌细胞皮下移植到C57BL/6J小鼠体内时，与对照细胞移植组相比，RAMP3-/-细胞移植组的肿瘤重量显着受到抑制。在 RAMP3-/- 细胞移植组中，观察到癌症相关成纤维细胞 (CAF) 标记物 SM22α 以及上皮间质转化 (EMT) 诱导剂 TGF-β1 和 Snail 的表达降低。由于RAMP3有助于癌症微环境中CAF的恶性转化，因此有望成为癌症治疗中的新治疗靶点。

项目成果

Adrenomedullin-RAMP2 and -RAMP3 systems regulate cardiac homeostasis during cardiovascular stress.

肾上腺髓质素-RAMP2 和-RAMP3 系统在心血管应激期间调节心脏稳态。

• DOI: 10.1210/endocr/bqab001
• 发表时间: 2021-01-06
• 期刊: Endocrinology
• 影响因子: 4.8
• 作者: Nanqi Cui;T. Sakurai;Akiko Kamiyoshi;Yuka Ichikawa;Hisaka Kawate;Megumu Tanaka;Masaaki Tanaka;Yangxuan Wei;Shinji Kakihara;Yunlu Zhao;Kohsuke Aruga;H. Kawagishi;Tsutomu Nakada;M. Yamada;T. Shindo
• 通讯作者: T. Shindo

AM-RAMP2系の血管恒常性制御を介したリンパ節転移抑制作用

AM-RAMP2系统调节血管稳态抑制淋巴结转移

• 发表时间: 2022
• 作者: 田中愛

Receptor activity modifying protein RAMP sub-isoforms and their functional differentiation, which regulates functional diversity of adrenomedullin

受体活性修饰蛋白 RAMP 亚型及其功能分化，调节肾上腺髓质素的功能多样性

• DOI: 10.3390/biology11050788
• 发表时间: 2022
• 作者: Shindo T; Tanaka M; Kamiyoshi A; Ichikawa
• 通讯作者: Ichikawa

アドレノメデュリン-RAMP2系による、高内皮細静脈を介したリンパ節転移の制御

肾上腺髓质素-RAMP2系统通过高内皮小静脉控制淋巴结转移

• 发表时间: 2023
• 作者: 田中愛

Adrenomedullin ameliorates pulmonary fibrosis by regulating TGF-b-Smads signaling and myofibroblast differentiation

肾上腺髓质素通过调节 TGF-b-Smads 信号传导和肌成纤维细胞分化改善肺纤维化

• DOI: 10.1210/endocr/bqab090
• 发表时间: 2021
• 影响因子: 4.8
• 作者: Wei Y; Tanaka M; Sakurai T; Kamiyoshi A; Ichikawa
• 通讯作者: Ichikawa