チロシンホスファターゼによる脳神経の増殖分化シグナル制御機構の解明
阐明酪氨酸磷酸酶对脑神经增殖和分化信号的控制机制
基本信息
- 批准号:07857166
- 负责人:
- 金额:$ 0.7万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1995
- 资助国家:日本
- 起止时间:1995 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
レセプター型チロシンホスファターゼLARとチロシンキナーゼFynの発現ベクターを構築し、COS7細胞にダブルトランスフェクション後、抗LAR、抗Fyn、抗チロシン燐酸化抗体を用いて解析を行った。その結果、酵素活性中心を変異させたLARと野性型Fynのダブルトランスフェクションにより、これら2つの分子は会合して存在していること、また野性型LARとチロシンキナーゼをネガティブに制御しているC末端を変異させ、構成的にキナーゼが活性化されているFynを用いた検討では、LARはFynの自己燐酸化チロシン残基を脱燐酸化することが明らかとなった。さらに興味深いことにはLARの細胞内ドメインはFynによってチロシン燐酸化されることであった。このFynによるLARのチロシン燐酸化がLARの酵素活性あるいは特異的基質に対するアフィニティーに影響を及ぼすかは現在検討中である。一方、Fynはミエリン形成に重要なチロシンキナーゼであるということが知られている。またLARも脳で発現していることが明らかにされている。これらのことと上記の結果より、ミエリン形成にLARは機能しているのではないかとの推測を立て、シュワン細胞に分化しうるヒト神経芽細胞腫を用いてLARの発現を調べたところ、その高発現が確認できた。現在この細胞を用いてLARとFyn、ミエリン形成シグナル伝達との関係も検討中である。さらに興味深いことにLARはインスリンレセプターのシグナル伝達をも、Fynとの関係に類似した作用機構で制御していることも明らかとした。よって本研究によりLARはこれらチロシンキナーゼの制御に必要不可欠の酵素であることが明らかとなり、その研究の進展が注目される。
构建了受体型酪氨酸磷酸酶LAR和酪氨酸激酶FYN的表达载体,并在双重转染转染过COS7细胞后,使用抗大球,抗F-FYN和抗酪氨酸磷酸化抗体进行分析。结果,用突变的酶活性中心和野生型Fyn对LAR进行双重转染表明,这两个分子存在在一起,而当使用FYN进行的一项研究将C-末端进行突变的FYN进行负调节的野生型LAR和酪氨酸激酶,从而降低了自体磷酸化蛋白蛋白质的蛋黄酱,该蛋白会降低蛋黄酱。更有趣的是,LAR的细胞内结构域是Fyn磷酸化的酪氨酸。 Fyn对LAR的这种酪氨酸磷酸化是否会影响LAR的活性或与特定底物的亲和力的酶活性。另一方面,FYN对于髓磷脂形成很重要。也已经表明,LAR在大脑中表达。基于这些和上面的结果,我们推测LAR可能在髓磷脂的形成中起作用,当我们使用人神经母细胞瘤检查LAR的表达时,可以将其分化为Schwann细胞时,我们确认了它的高表达。目前,正在使用这些细胞研究LAR,FYN和髓磷脂形成信号传导之间的关系。更有趣的是,还揭示了LAR还通过类似于其与Fyn的关系的作用机理来调节胰岛素受体的信号传导。因此,这项研究表明,LAR是调节这些酪氨酸激酶的必不可少的酶,这项研究的进步引起了人们的关注。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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