チロシンホスファターゼによる脳神経の増殖分化シグナル制御機構の解明

阐明酪氨酸磷酸酶对脑神经增殖和分化信号的控制机制

基本信息

批准号：
07857166
负责人：
辻川和丈
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07857166/
关键词：
チロシンホスファターゼ脳神経増殖分化シグナル伝達

项目摘要

レセプター型チロシンホスファターゼLARとチロシンキナーゼFynの発現ベクターを構築し、COS7細胞にダブルトランスフェクション後、抗LAR、抗Fyn、抗チロシン燐酸化抗体を用いて解析を行った。その結果、酵素活性中心を変異させたLARと野性型Fynのダブルトランスフェクションにより、これら2つの分子は会合して存在していること、また野性型LARとチロシンキナーゼをネガティブに制御しているC末端を変異させ、構成的にキナーゼが活性化されているFynを用いた検討では、LARはFynの自己燐酸化チロシン残基を脱燐酸化することが明らかとなった。さらに興味深いことにはLARの細胞内ドメインはFynによってチロシン燐酸化されることであった。このFynによるLARのチロシン燐酸化がLARの酵素活性あるいは特異的基質に対するアフィニティーに影響を及ぼすかは現在検討中である。一方、Fynはミエリン形成に重要なチロシンキナーゼであるということが知られている。またLARも脳で発現していることが明らかにされている。これらのことと上記の結果より、ミエリン形成にLARは機能しているのではないかとの推測を立て、シュワン細胞に分化しうるヒト神経芽細胞腫を用いてLARの発現を調べたところ、その高発現が確認できた。現在この細胞を用いてLARとFyn、ミエリン形成シグナル伝達との関係も検討中である。さらに興味深いことにLARはインスリンレセプターのシグナル伝達をも、Fynとの関係に類似した作用機構で制御していることも明らかとした。よって本研究によりLARはこれらチロシンキナーゼの制御に必要不可欠の酵素であることが明らかとなり、その研究の進展が注目される。

构建受体型酪氨酸磷酸酶LAR和酪氨酸激酶Fyn的表达载体，双转染COS7细胞后，使用抗LAR、抗Fyn和抗酪氨酸磷酸化抗体进行分析。结果，通过双转染酶活性中心突变的LAR和野生型Fyn，我们发现这两个分子相互关联存在，并且负调节酪氨酸激酶的野生型LAR和C是使用具有突变末端和组成型激活激酶的 Fyn 的研究表明，LAR 可以使 Fyn 中的自磷酸化酪氨酸残基去磷酸化。更有趣的是，LAR 的胞内结构域被 Fyn 磷酸化。我们目前正在研究 Fyn 对 LAR 的酪氨酸磷酸化是否会影响 LAR 的酶活性或其对特定底物的亲和力。另一方面，已知 Fyn 是一种对髓磷脂形成很重要的酪氨酸激酶。研究还表明，LAR 也在大脑中表达。基于这些和上述结果，我们假设LAR可能在髓磷脂形成中发挥作用，并使用可分化为雪旺细胞的人神经母细胞瘤细胞研究了LAR的高表达。我们目前正在使用这些细胞研究 LAR、Fyn 和髓磷脂形成信号传导之间的关系。更有趣的是，还发现 LAR 还通过类似于 Fyn 的机制调节胰岛素受体信号传导。因此，这项研究揭示了LAR是调节这些酪氨酸激酶的必需酶，这项研究的进展将会令人感兴趣。