ライムギにおけるB染色体上のアイソザイム遺伝子座の検索

黑麦 B 染色体上同工酶位点的搜索

基本信息

批准号：
07760007
负责人：
丹羽克昌
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760007/
关键词：
ライムギ B染色体染色体添加系統アイソザイム

项目摘要

韓国産栽培型ライムギ(Secale cereale)のB染色体上のアイソザイム遺伝子を検出するために、韓国産ライムギのB染色体のみをパンコムギ(Triticum aestivum)に添加した系統を用い、アコニターゼ(ACO)、酸性ホスフォターゼ(ACP)、グルコース-6ーリン酸脱水素酵素(G6PDH)、リンゴ酸脱水素酵素(MDH)、6-ホスホグルコムターゼ(PGM)、パーオキシターゼ(POD)、シキミ酸脱水素酵素(ShDH)、ホスホグルコン酸脱水素酵素(6PGD)の8種類の酵素についてアイソザイム分析を行った。播種後7日から14日後のパンコムギとB染色体添加パンコムギの実生をそれぞれ抽出緩衝液中でホモジネートし、その上澄をスラブ型ポリアクリルアミドゲルで電気泳動後、活性染色を行い、ザイモグラムを比較した。その結果、ACP、G6PDH、MDH、PGM、および6PGDでは、それぞれパンコムギとB染色体添加パンコムギのバンドパターンに違いは認められなかった。このことはライムギのB染色体上に、これらのアイソザイム遺伝子が座乗していないことを示す。また、ACOとShDHでは出現したアイザイムバンドはきわめて薄く、PODではテーリングにより、バンドの数と移動度が不明瞭な部分があり、B染色体の有無によるバンドパターンの違いを確認することはできなかった。これは、試料の抽出時の条件や染色液の組成などが原因であると考えられる。今後この点を検討し、これらの酵素に関して再び研究を続けていく。

为了检测韩国栽培黑麦（Secalealee）B染色体上的同工酶基因，仅从面包小麦（Triticum）中分离出韩国黑麦的B染色体。普通小麦）、乌头酸酶（ACO）、酸性磷酸酶（ACP）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）、苹果酸脱氢酶（MDH）、6-对八种酶进行同工酶分析：磷酸葡萄糖变位酶 (PGM)、过氧化物酶 (POD)、莽草酸脱氢酶 (ShDH) 和磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (6PGD)。将播种后7～14天的面包小麦和添加B染色体的面包小麦幼苗在提取缓冲液中匀浆，将上清液在平板型聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳，然后进行活性染色，并比较酶谱。结果，面包小麦和添加B染色体的面包小麦的ACP、G6PDH、MDH、PGM和6PGD的带型分别没有观察到差异。这表明这些同工酶基因并不位于黑麦的B染色体上。另外，ACO和ShDH中出现的酶条带非常细，POD中存在因拖尾而导致条带数量和移动性不清楚的部分，无法确认因有无而导致的条带图案的差异。或缺乏 B 染色体。这被认为是由样品提取过程中的条件和染色溶液的成分引起的。今后我们会考虑这一点，继续对这些酶进行研究。