S.mitisスーパー抗原のT細胞賦活化とその歯周炎発症における役割

T细胞激活S.mitis超抗原及其在牙周炎发生中的作用

基本信息

批准号：
07771774
负责人：
松下健二
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771774/
关键词：
Streptococus mitis Super antigen 細胞障害性口腔粘膜疾患

项目摘要

スーパー抗原F-2の歯周炎の病因との関連を明らかにするめに、以下の実験をおこなった。1.F-2により誘導されるT細胞レパトアの同定5名の被験者から分離したヒト末梢血単核細胞をアクセサリー細胞とし、これに精製F-2抗原および同じ被験者から採ったヒト末梢血T細胞を添加した。3日間培養後、T細胞のみを回収し、これらの細胞のTCR VβレパトアをRT-PCR法で同定した。2.F-2およびF-2誘導T細胞の歯周組織由来細胞に対する障害活性1名の健康な被験者から分離した末梢T細胞をF-2および不活化末梢血単核細胞存在下で3日間培養した。ヒト歯肉線維芽細胞ならびにヒト歯肉上皮角化細胞の単層培養プレートにこのF-2活性化T細胞とF-2を添加し、4時間培養した。培養終了後、培養プレートの各ウエルを数回洗浄し、ウエルに残った生残細胞をクリスタルバイオレットで染色し、595nmにおける吸光度を測定した。これらの実験から、以下に示すような結果を得た。1.F-2で刺激を受けたT細胞では、Vβ2,Vβ5.1をTCRにもつT細胞が選択的に増加していることが明らかになった。2.F-2により活性化されたT細胞は、ヒト歯肉線維芽細胞およびヒト歯肉上皮細胞に対して強い障害性を示した。また、この時F-2を添加することによってその障害性は濃度依存性に増大した。なお、F-2によるこれらの標的細胞に対する直接の毒性はみられなかった。以上の結果から、F-2活性化T細胞による歯周組織細胞を標的とした細胞障害活性は、T細胞の増加および浸潤を特徴とする口腔粘膜疾患の病因に深く関わっている可能性が示唆された。

为了阐明超抗原F-2与牙周炎发病机理的关联，进行了以下实验。 1。鉴定F-2诱导的T细胞曲目人类外周血单核细胞从五个受试者中分离为辅助细胞，并将纯化的F-2抗原和人类外周血T细胞从同一受试者中添加到这些细胞中。培养3天后，仅收集T细胞，并通过RT-PCR方法鉴定出这些细胞的TCRVβ曲目。 2。在F-2的存在下培养了从一个健康受试者分离的F-2和F-2诱导的T细胞的损伤活性，并将外周血单核细胞灭活3天。将F-2激活的T细胞和F-2添加到人牙龈成纤维细胞和人牙龈上皮角质形成细胞的单层培养板中，并培养4小时。培养完成后，将培养板的每个孔洗涤几次，并用晶体紫罗兰染色井中的剩余存活细胞，并测量595 nm处的吸光度。以下结果是从这些实验中获得的。 1。揭示了用F-2刺激的T细胞选择性地增加了用Vβ2和Vβ5.1TCR刺激的T细胞。 2.F-2激活的T细胞对人牙龈成纤维细胞和人牙龈上皮细胞显示出强大的损害。此外，此时添加F-2将损伤增加到浓度依赖性方式。此外，通过F-2观察到对这些靶细胞的直接毒性。上述结果表明，通过F-2激活的T细胞靶向牙周组织细胞的细胞毒性活性可能与以T细胞增加和浸润为特征的口腔粘膜疾病的发病机理深深涉及。