歯周病関連菌リボゾーム画分に存在する免疫活性物質の研究

牙周病相关细菌核糖体部分中免疫活性物质的研究

• 批准号: 07771697
• 负责人: 大原 直也
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771697/
• 关键词: リボゾーム蛋白質; 遺伝子; 歯周疾患関連菌

歯周疾患関連菌のリボゾーム蛋白質の免疫活性を研究する前段階として、リボゾーム蛋白質をコードしている遺伝子およびその遺伝子から推測されるアミノ酸配列について検討をおこなった。そのために、Porphyromonas gingivalisについてはそのゲノムDNAを4塩基対認識酵素で部分分解後、λファージを用いて遺伝子ライブラリーを作成した。Actinobacillus actinomycetemcomitansについては6塩基対認識酵素で完全分解ゲノムサザン法をおこなった。両者に対するプローブとして、既知のBacillus属あるいはMycobacterium属のリボゾーム蛋白質遺伝子を用いクローニングをおこなった。その結果、A.actinomycetemcomitansのリボゾーム蛋白質遺伝子については興味深い知見が得られた。S10オペロン、spcオペロンのクラスター配列が、A.actinomycetemcomitansにおいては他の細菌とは異なっていた。この理由として、この菌ではS10オペロンの下流に存在した挿入配列様構造(ISAal)が原因と考えられる。他のリボゾーム蛋白質遺伝子のオペロンもこのISAalによって、オペロン間の配列が乱されていることが示唆された。次にISAalのコピー数について検討した。血清型a,b,cの数株について調べたところ、ISAalのコピー数は血清型によって異なることが示唆された。このことについてはさらにサンプル数を増やして検討する必要がある。以前より血清型bの病原性が強いことがいわれているが、このISAalのコピー数、挿入部位(特にリボゾーム蛋白質遺伝子のオペロン)との相関関係の有無については今後の検討課題である。

作为研究牙周病相关细菌中核糖体蛋白免疫活性的初步步骤，我们研究了编码核糖体蛋白的基因以及从这些基因推导的氨基酸序列。为此，我们用4碱基对识别酶部分消化牙龈卟啉单胞菌的基因组DNA，并使用λ噬菌体创建了基因文库。对于Actinobacillus actinomycetemcomitans，使用6碱基对识别酶进行完全分解基因组Southern方法。作为两者的探针，使用芽孢杆菌属或分枝杆菌属的已知核糖体蛋白基因进行克隆。结果，获得了关于 A. actinomycetemcomitans 的核糖体蛋白基因的有趣发现。 A. actinomycetemcomitans 中的 S10 操纵子和 spc 操纵子的簇序列与其他细菌中的不同。其原因被认为是该细菌中存在于 S10 操纵子下游的插入序列样结构 (ISAal)。表明其他核糖体蛋白基因的操纵子序列也被该ISAal破坏。接下来，我们检查了 ISAal 的拷贝数。对血清型 a、b 和 c 的几种菌株的研究表明，ISAal 的拷贝数根据血清型而不同。这个问题需要通过增加样本数量来进一步研究。一段时间以来，一直有人说b血清型致病性更强，但ISAal的拷贝数与插入位点（特别是核糖体蛋白基因操纵子）之间是否存在相关性，还有待未来研究。