P.gingivalisの生体内環境における病原性発現調節機構の解析

牙龈卟啉单胞菌体内环境致病性表达调控机制分析

• 批准号: 17019057
• 负责人: 大原 直也
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17019057/
• 关键词: ゲノム; 細菌; 感染症; 歯学; 遺伝子

Porphyromonas gingivalis(P.gingivalis)はもっとも有力な歯周疾患の原因菌と考えられている。また近年では全身の慢性炎症性疾患との関連性も強く疑われている。宿主内で多く発現している遺伝子が病原性に関わっている可能性が高い。BALB/cマウス背部皮下に埋入したコイル内腔にP.gingivalis W83株を接種し、6時間後に菌体を回収した。回収された菌体で発現量の上昇した蛋白質の中で3種、immunoreactive 61 kDa antigen PG91、DNA-binding response regulator RprY、TPR domain proteinに着目し、W83株を用いてそれぞれの遺伝子変異株を作製した。RprYは2成分制御系の調節蛋白質分子であり、マウスを用いて各変異株の病原性を検討したところ、PG91欠損株の病原性は親株(野生株)との間に差が見いだせなかったが、RprY、TPR domain proteinそれぞれの欠損株では病原性が顕著に減弱していた。RprYは2成分制御系の調節蛋白質分子であり、またTPR domainは真核細胞においてシャペロン分子の足場のような役割をしていることから、両者が複数の病原性因子の調節に関わっていることが示唆される。ゲノム情報からのアプローチとしてW83株とATCC33277株で異なっている莢膜合成に関する酵素の遺伝子欠損株を作製した。また33277株をベースとしてトランスポゾンTn4351の挿入変異株ライブラリーを作製した。これらの株について今後病原性の検討をおこなう必要がある。

牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）被认为是牙周病最可能的病原体。近年来，也有人强烈怀疑其与全身慢性炎症性疾病有关。在宿主内高表达的基因很可能与致病性有关。将牙龈卟啉单胞菌菌株W83接种到BALB/c小鼠背部皮下植入的线圈管腔中，6小时后收集菌体。我们重点关注在回收的细菌细胞中表达水平增加的三种蛋白质：免疫反应性 61 kDa 抗原 PG91、DNA 结合反应调节剂 RprY 和 TPR 结构域蛋白，并使用菌株 W83 为每种蛋白质创建了基因突变菌株。 RprY是二元调节系统中的调节蛋白分子，当我们用小鼠检查每个突变株的致病性时，我们发现PG91缺陷株的致病性与亲本株（野生株）相比没有差异。 、RprY 和 TPR 结构域蛋白缺陷菌株的毒力显着降低。 RprY是双组分调节系统中的调节蛋白分子，TPR结构域在真核细胞中起着分子伴侣分子的作用，表明两者都参与多种毒力因子的调节。作为一种基于基因组信息的方法，我们创建了一种参与荚膜合成的酶的基因缺陷菌株，这在W83菌株和ATCC33277菌株之间是不同的。此外，我们还基于菌株 33277 创建了转座子 Tn4351 插入突变体文库。今后有必要进一步研究这些菌株的致病性。

项目成果

The novel stationary-phase-upregulated protein of Porphyromonas gingivalis influences the production of superoxide dismutase, thiol peroxidase and thioredoxin.

牙龈卟啉单胞菌的新型稳定期上调蛋白影响超氧化物歧化酶、硫醇过氧化物酶和硫氧还蛋白的产生。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Microbiology-SGM 151・3
• 作者: Matsumoto S;Kanekiyo M;Ami Y;Oiso R;松本 壮吉;松本 壮吉;Zhang Z;Soejima H;Arima T;Yamasaki Y;Soejima H;Haruta M;副島英伸;Naoya Ohara;Marika Naito;Yuichiro Kikuchi
• 通讯作者: Yuichiro Kikuchi